一、有关应激及糖皮质激素影响海马LTP的研究进展（论文文献综述）
王子元[1]（2021）在《急性应激障碍向创伤后应激障碍发展模型的建立及机制研究》文中研究说明超出人体适应能力的应激会引起机体心理、生理的失衡,甚至发展成为应激障碍。急性应激障碍（acute stress disorder,ASD）和创伤后应激障碍（post-traumatic disorder,PTSD）是应激障碍的两个主要类别。二者的临床表现相似,均是严重的焦虑反应和对创伤线索的重度恐惧;二者的主要区别在于症状持续时间,1个月内诊断为ASD,超过1个月则诊断为PTSD。多项研究表明,ASD对PTSD具有中等强度的预测效度,即超过半数的ASD患者最终会发展为PTSD。不过目前对ASD发展为PTSD机制的了解并不透彻,临床中也缺乏有效的防治药物。一个良好的动物模型对于深入认识疾病的发病机制以及研发防治药物具有重要作用。然而,针对应激障碍已有研究多采用单一的条件恐惧模型,这与应激障碍的临床诊断标准不符。此外,目前多数应激障碍的动物模型只关注PTSD阶段的病理生理变化,缺乏ASD向PTSD发展关系和机制的研究。一个良好的ASD向PTSD发展动物模型应该具有以下三个特征:能够在应激后的不同阶段出现同临床相符的症状,表现出与临床中应激障碍相似的发病规律,即良好的表观效度;同时,模型动物的病理生理机制（如糖皮质激素变化）应该同临床保持一致,即良好的结构效度;最后,现有治疗的药物能在该模型上表现出治疗效果,即良好的预测效度。ASD向PTSD的发展过程涉及到多种生物学机制。主流观点认为创伤后早期阶段的应激相关记忆巩固增强或消退障碍,是ASD症状难以缓解、从而发展为PTSD的关键原因之一。N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid,NMDA）受体是一种离子型的谷氨酸受体,介导中枢神经系统的正常突触传递,与学习记忆密切相关;同时NMDA受体也是应激激素的重要作用靶点,是介导创伤记忆巩固或消退的重要因素之一。因此,调节NMDA受体功能可能具有改善应激障碍的作用。但激动还是拮抗NMDA受体具有改善作用仍然存在争议,既有拮抗NMDA受体（氯胺酮）可改善PTSD症状的研究,也有增强NMDA受体（D-丝氨酸）可改善的研究,并且缺乏NMDA受体功能对ASD向PTSD发展过程影响的相关研究。综上,本研究包括以下三部分:首先,建立ASD向PTSD发展的动物模型,依据临床患者在创伤暴露后行为及病理生理指标的动态变化对模型进行评价。然后,采用所建立的动物模型,观察现有PTSD治疗药物舍曲林（Sertraline,SER）的治疗作用,同时初步评价实验室前期筛选出的钩藤源生物碱297 （化合物297）对ASD向PTSD发展的影响及可能机制。最后,在所建立的模型上,观察NMDA受体及其亚型的拮抗剂和激动剂对ASD向PTSD发展的影响,以期阐明NMDA受体及其亚型的功能在ASD向PTSD发展的作用。1.急性应激障碍向创伤后应激障碍发展模型的建立建立小鼠ASD向PTSD发展的模型,为应激障碍机制研究和防治药物评价提供动物模型。采用连续三天足底电击对小鼠进行应激,急性期行为学实验于应激后第1天到第3天进行;慢性期于第28天到第30天进行。行为学实验包括旷场实验、情景恐惧和创伤相关线索回避实验。运用行为特征分析（behavior profile）,在每项行为学中选取最具代表性的一项指标,以对照组数据的“平均值±0.5倍标准差”作为所选指标的“临界值”,三个指标均超出临界值的小鼠即为患病小鼠。结果显示,模型组小鼠在急、慢性期均显示出明显的主动回避和再体验行为;急性期出现焦虑样行为,然而在慢性期阶段消失;模型组小鼠主动回避和再体验行为分别在急、慢性期存在正相关。行为特征分析结果表明,模型小鼠ASD和PTSD的发病率分别为57.7%和30.8%,与临床相似。应激结束后半小时,模型组小鼠的血浆皮质酮水平明显高于正常对照组,应激后第30天模型组小鼠的血浆皮质酮水平明显低于正常对照组。上述研究结果表明,模型组小鼠在应激后的急性期和慢性期表现出与临床相似的症状,且ASD与PTSD的患病率同临床相似,说明本模型具有良好的表观效度;模型小鼠在应激后的血浆皮质酮水平变化趋势与临床一致,说明本模型具有良好的结构效度。因此,本部分研究成功建立了具有良好表观效度和结构效度的小鼠急性应激障碍向创伤后应激障碍发展的模型。2.舍曲林和化合物297治疗给药对应激障碍发展影响的研究本部分研究采用已建立的动物模型,选择PTSD治疗药物SER作为阳性药,观察此模型对现有治疗药物的反应,从而评价所建模型的预测效度;同时观察实验室前期筛选出的化合物297治疗给药对应激障碍发展的影响。本实验分别在应激结束后单次或长期（连续20天）给予小鼠阳性药SER或化合物297,观察它们对应激障碍行为及发展的影响。结果显示,单次给予SER对应激小鼠的应激障碍发展无明显影响;而SER长期给药组小鼠在创伤线索回避实验中的探索时间显着高于应激组;惊跳反射实验中的最大惊吓幅度显着低于应激组,同时PTSD患病率和ASD向PTSD的转化率显着低于应激组。单次给予化合物297可以显着提升应激小鼠急、慢性期情景恐惧实验中的僵直时间并有降低创伤线索回避实验中探索时间的趋势,同时PTSD患病率和ASD向PTSD的转化率高于应激组。长期给予应激小鼠化合物297有提升慢性期情景恐惧实验中的僵直时间的趋势,PTSD的患病率以及ASD向PTSD的转化率明显高于应激组。所有给药组的血浆皮质酮水平和海马区域NR2A、NR2B、BDNF和TrkB受体蛋白的表达同应激组间均无明显差异。上述研究结果表明,长期给予SER有助于缓解PTSD的主动回避症状,降低PTSD的患病率和转化率,表明模型具有良好的预测效度;长期给予化合物297可能增加PTSD的患病率和ASD向PTSD的转化率。3.NMDA受体功能对应激障碍发展影响的研究本部分研究采用所建立的动物模型,通过于每次应激后30分钟给予不同种类的NMDA受体或其亚型的激动剂或拮抗剂作为工具药,观察并分析NMDA受体功能在应激障碍发展中的作用。实验中分别采用D-丝氨酸激动NMDA受体、艾芬地尔+D-丝氨酸组合激动NR2A受体、PEAQX+D-丝氨酸组合激动NR2B受体、美金刚拮抗NMDA受体、PEAQX拮抗NR2A受体以及艾芬地尔拮抗NR2B受体。结果发现,无论是激动还是拮抗NMDA受体对应激小鼠急、慢性期的旷场实验相关指标和情景恐惧实验的僵直实践均无明显影响。在急性期创伤线索回避实验中,同模型组比较,艾芬地尔组、PEAQX组及艾芬地尔+D-丝氨酸组小鼠的探索时间有降低的趋势;慢性期时,艾芬地尔组、D-丝氨酸组、PEAQX组、艾芬地尔+D-丝氨酸组和PEAQX+D-丝氨酸组小鼠的探索时间同模型组比较均有降低的趋势。采用行为特征分析后发现,在每次应激后激动NR2A受体ASD患病率明显升高,与应激对照组比较,具有统计学意义;所有给药组小鼠的PTSD患病率均明显高于应激组;而且拮抗NMDA受体、拮抗NR2B受体、拮抗NR2A受体、激动NR2A受体和激动NR2B受体均可提升应激小鼠ASD向PTSD的转化率。此外,实验结果还显示,无论是激动还是拮抗NMDA受体对应激小鼠慢性期的血浆皮质酮水平和海马区域NR2A、NR2B、BDNF和TrkB受体蛋白的表达均无显着影响。上述研究结果表明,无论是激动还是拮抗NMDA受体或其亚型,均可能造成应激小鼠急、慢性期的主动回避症状加重,并提升慢性期PTSD的患病率和转化率。4.结论（1）连续三天的足底电击可以诱导小鼠在应激后的急性期和慢性期产生焦虑样行为、主动回避行为和再体验行为。通过行为特征分析表明,与急性期相比应激小鼠慢性期的患病率呈下降趋势,且出现ASD症状的小鼠可能更容易发展为PTSD。此现象同临床发病规律相似,表明模型具有良好的表观效度。模型小鼠在应激后急性期血浆皮质酮水平显着升高,而在慢性期显着降低,同临床变化规律一致,表明模型具有良好的结构效度。长期给予PTSD治疗药物舍曲林能够有效缓解应激小鼠主动回避行为,同时能够降低PTSD的患病率和转化率,表明模型具有良好的预测效度。（2）基于本研究建立的ASD向PTSD发展模型,应激结束后单次腹腔注射化合物297可能使应激小鼠急性期和慢性期的再体验症状和主动回避症状产生恶化并提升应激小鼠PTSD的患病率和ASD向PTSD的转化率;应激结束后长期给予化合物297可能使应激后慢性期的再体验症状产生恶化并提升应激小鼠ASD向PTSD的转化率,其中涉及的相关机制需要进一步研究。（3）基于本研究建立的ASD向PTSD发展模型,每次应激后立即调节NMDA受体或其亚型的功能,无论是增强还是抑制其功能均可能会使应激小鼠的主动回避症状产生恶化并提升慢性期PTSD的患病率和转化率,其中涉及的相关机制需要进一步研究。
余健[2]（2021）在《内源性大麻素系统在抑郁大鼠电休克后学习认知损伤中的作用及机制研究》文中研究指明目的探讨电休克（electroconvulsive shock,ECS）对抑郁症模型大鼠抑郁样行为、学习记忆功能和内源性大麻素系统的影响,并进一步研究抑制大麻素受体Ⅰ型（cannabinoid receptor type 1,CB1R）对ECS所引起的抑郁样行为、学习记忆功能、长时程增强（long-term potentiation,LTP）和突触相关蛋白表达改变的调控作用,以期从内源性大麻素系统角度发掘新的预防ECS认知副作用的干预靶点。方法第一部分选取健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（2-3月龄）建立抑郁大鼠模型,建模方法为慢性温和应激（chronic mild stress,CMS）法。选取糖水偏好比（sucrose preference percentage,SPP）低于65%作为建模成功的抑郁大鼠20只,随机分成2组（n=10）:假电休克组（Sham组）及电休克组（ECS组）。Sham组进行假ECS处理（不通电）,ECS组进行ECS处理。ECS处理持续7天,每日一次。采用糖水偏好实验（sucrose preference test,SPT）,旷场实验（open field test,OFT）评估大鼠抑郁样行为;采用Morris水迷宫实验（morris water maze,MWM）评估大鼠学习记忆功能;Western blot实验检测海马CB1R及单酰基甘油酯酶（monoacylglycerol lipase,MAGL）的蛋白表达;免疫组化法观察大鼠海马CA1区、CA3区、DG区CB1R的蛋白表达;液相色谱-串联质谱法检测2-花生四烯酸甘油（2-arachidonoylglycerol,2-AG）的水平。第二部分选取健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（2-3月龄）建立抑郁大鼠模型,建模方法为慢性温和应激（chronic mild stress,CMS）法。选取SPP低于65%作为建模成功的抑郁大鼠60只,随机分成4组（n=15）:假电休克组（Sham组）、假电休克+CB1R拮抗剂N-（哌啶-1-基）-5-（4-碘苯基）-1-（2,4-二氯苯基）-4-甲基-1氢-吡唑-3-甲酰胺（N-（piperidin-1-yl）-5-（4-iodophenyl）-1-（2,4-dichlorophenyl）-4-methyl-1H-pyrazole-3-carboxamide,AM251）组（Sham+AM251组）、电休克组（ECS组）及电休克+AM251组（ECS+AM251组）。CB1R抑制剂AM251溶解于二甲基亚砜中,配制浓度1mg/ml。Sham组腹腔注射1ml/kg的生理盐水后,静待30min进行假ECS处理;Sham+AM251组腹腔注射1ml/kg的AM251后,静待30min后进行假ECS处理;ECS组腹腔注射1ml/kg的生理盐水后,静待30min进行ECS处理;ECS+AM251组腹腔注射1ml/kg的AM251后,静待30min后进行ECS处理。ECS处理每天一次,持续7天。采用SPT和OFT评估大鼠抑郁样行为;MWM实验评估大鼠学习记忆功能;细胞外场电位记录实验检测海马Shaffer侧枝-CA1神经通路LTP水平;Western blot实验检测海马环磷腺苷效应元件结合蛋白（cyclic AMP response element binding,CREB）,磷酸化CREB（phospho-cyclic AMP response element binding,pCREB）及突触后致密物95（postsynaptic density-95,PSD95）的蛋白表达。结果第一部分（1）大鼠抑郁样行为:ECS处理前两组大鼠SPP、水平活动距离和中央区活动时间组间未见显着差异（P>0.05）,ECS处理后,ECS组SPP、水平活动距离和中央区活动时间明显高于Sham组,具有统计学差异（P<0.05）,提示ECS可缓解大鼠抑郁样行为。（2）大鼠认知功能:两组大鼠ECS处理前游泳速度组间无明显差异（P>0.05）,逃避潜伏期组间无明显差异（P>0.05）;ECS处理后,ECS组大鼠逃避潜伏期明显高于Sham组,具有统计学差异（P<0.05）;ECS处理前,两组大鼠空间探索时间组间无明显差异（P>0.05）;ECS处理后,ECS组大鼠空间探索时间明显低于Sham组,具有统计学差异（P<0.05）,提示ECS可引起大鼠学习记忆功能下降。（3）大鼠海马组织内源性大麻素系统:ECS组大鼠CB1R蛋白表达水平明显高于Sham组,具有统计学差异（P<0.05）;ECS大鼠CB1R蛋白平均光密度值明显高于Sham组（P<0.05）;ECS组大鼠2-AG水平明显高于Sham组（P<0.05）;两组大鼠MAGL蛋白表达水平组间无明显差异（P>0.05）,提示ECS可引起大鼠内源性大麻素系统激活。第二部分（1）大鼠抑郁样行为:ECS处理前,各组大鼠SPP水平组间差异不显着（P>0.05）;ECS处理后,ECS处理与AM251处理对SPP的影响没有交互作用（P>0.05）,ECS处理是影响SPP的独立影响因素（P<0.05）,而AM251处理不是（P>0.05）;ECS处理可以升高大鼠SPP水平,而AM251处理对大鼠SPP水平无影响。ECS处理前,各组大鼠水平活动距离与中央区活动时间组间差异不显着（P>0.05）;ECS处理后,ECS处理与AM251处理对水平活动距离与中央区活动时间的影响没有交互作用（P>0.05）,ECS处理是影响水平活动距离与中央区活动时间的独立影响因素（P<0.05）,而AM251处理不是（P>0.05）;ECS处理可以升高大鼠水平活动距离与中央区活动时间水平,而AM251处理对大鼠水平活动距离与中央区活动时间水平无影响。以上结果提示AM251对大鼠抑郁样行为无显着影响。（2）大鼠认知功能:各组大鼠ECS处理前游泳速度组间差异无统计学意义（P>0.05）;ECS处理前,各组大鼠逃避潜伏期组间差异无统计学意义（P>0.05）;ECS处理后,ECS处理与AM251处理对逃避潜伏期的影响具有交互作用（P<0.05）,ECS处理与AM251处理共同作用影响了逃避潜伏期;AM251处理在大鼠接受ECS处理时可降低其逃避潜伏期。ECS处理前,各组大鼠空间探索时间组间差异不显着（P>0.05）;ECS处理后,ECS处理与AM251处理对空间探索时间的影响具有交互作用（P<0.05）,ECS处理与AM251处理共同作用影响了空间探索时间;AM251处理在大鼠接受ECS处理时可升高其空间探索时间。以上结果提示AM251可缓解ECS引起的学习记忆功能降低。（3）大鼠海马组织LTP水平:采用高频电刺激方案诱导LTP后,ECS处理与AM251处理对LTP水平的影响具有交互作用（P<0.05）,ECS处理与AM251处理共同作用影响了LTP的水平;AM251处理在大鼠接受ECS处理时可升高其LTP水平。（4）大鼠海马组织突触相关蛋白表达:ECS处理与AM251处理对CREB水平的影响不具有交互作用（P>0.05）,ECS处理与AM251处理均不影响CREB的水平。ECS处理与AM251处理对pCREB水平的影响具有交互作用（P<0.05）,ECS处理与AM251处理共同作用影响了pCREB的水平,AM251处理在大鼠接受ECS处理时可升高其pCREB水平。ECS处理与AM251处理对PSD95水平的影响具有交互作用（P<0.05）,ECS处理与AM251处理共同作用影响了PSD95的水平;AM251处理在大鼠接受ECS处理时可升高其PSD95水平。结论ECS可改善抑郁大鼠的抑郁状态,却可降低抑郁大鼠学习记忆功能,并可能与内源性大麻素系统CB1R、2-AG激活有关;使用内源性大麻素系统关键受体CB1R特异性拮抗剂AM251可在不影响ECS抗抑郁效果基础上,减轻抑郁大鼠ECS所致认知损伤,其机制可能与海马LTP增强及突触蛋白pCREB、PSD95表达增加有关。
于琪[3]（2021）在《调节LTP/LTD对创伤记忆消退的作用研究》文中提出目的:阐明NMDA受体功能变化在皮质酮（Corticosterone,CORT）致长时程增强（Long-term potentiation,LTP）和长时程抑制（Long-term depression,LTD）损伤中的作用和机制,在此基础上通过对LTP/LTD的精确调节,观察LTP/LTD对创伤记忆消退的影响。以期通过本研究为基于促进创伤记忆消退防治PTSD奠定基础。方法:1选择C57BL/6小鼠海马脑片CA3-CA1区,采用MED64 Mobius系统进行LTP/LTD记录和分析。首先采用0.033 Hz进行单脉冲刺激并记录场兴奋性突触后电位（f EPSP）,随后采用高频刺激（High-frequency stimulation,HFS）或低频刺激（Low-frequency stimulation,LFS）诱发LTP和LTD。2采用足底电击方法来建立条件恐惧模型,足底电击参数为:声音刺激20s（5000 Hz,78 d B）,足底电击1.5 m A,持续2 s,重复5次,每次间隔60 s,全程白噪音（60 d B）。以条件恐惧来模拟创伤应激,情景恐惧和线索恐惧作为评价条件恐惧模型的指标。结果:1调节NMDA受体功能对CORT致LTP/LTD损伤的影响采用含0.1μM-2μM CORT的ACSF循环灌流脑片,结果提示1μM CORT在不影响基础突触传递的同时可以显着损伤LTP和LTD。亚型非选择性N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂D-AP5（10μM）、Glu N2A拮抗剂TCN-201（0.1μM）和Glu N2B拮抗剂Ro25-6981（0.25μM）均不能改善CORT致LTP/LTD损伤,反而有加剧损伤的趋势;NMDA受体共激活剂D-Serine（10μM）（模拟同时激活Glu N2A和Glu N2B）可改善CORT致LTP/LTD损伤,与Glu N2B拮抗剂ifenprodil合用（模拟仅激活Glu N2A）时仅改善CORT致LTP损伤,对LTD损伤无显着影响,提示CORT致LTP/LTD损伤时NMDA受体功能可能是降低的,其中Glu N2A受体功能的降低可能介导CORT致LTP损伤。L-电压依赖性钙通道（L-VDCC）拮抗剂Nifedipine（30μM）有加剧CORT致LTP损伤的趋势,但可显着改善CORT致LTD损伤,提示L-VDCC是LFS时CORT使LTD转化为LTP的重要因素。2.调节LTP/LTD对创伤记忆消退的影响选用D-Serine与ifenprodil合用来改善LTP,选择Nifedipine来改善LTD,选择D-Serine来同时改善LTP和LTD。所选药物在3个不同的时间点进行干预,分别在创伤应激后、创伤环境重现前和创伤环境重现后,以考察不同时间点调节LTP/LTD功能对创伤记忆消退的作用特点和异同。在应激后1 d和30 d进行情景恐惧和线索恐惧测试中发现,创伤应激后立即改善LTP、改善LTD和同时改善LTP和LTD均可促进创伤记忆消退,其中同时改善LTP和LTD对创伤记忆消退的促进作用更好;在创伤应激后30 min给予所选药物处理,然后将小鼠放回创伤环境中进行创伤环境重现,结果提示在创伤环境重现前改善LTP、改善LTD和同时改善LTP和LTD均不能促进创伤记忆消退;在创伤应激后30 min先进行创伤环境重现,再分别给予所选药物处理,改善LTD或同时改善LTP和LTD可促进创伤记忆消退,表明在创伤环境重现后改善LTP/LTD可以促进创伤记忆消退,且同时改善LTP和LTD的效果更好。3化合物ZQS00297和ZQS00315对创伤记忆消退的影响创伤应激后立即给予40 mg/Kg的ZQS00297或ZQS00315,然后将小鼠放回笼中饲养。分别在创伤应激后1 d和30 d进行测试,结果提示在创伤应激后应用化合物ZQS00297或ZQS00315可促进创伤记忆消退。创伤应激后30 min后先将小鼠放回创伤环境中进行创伤环境重现,再给予40 mg/Kg的ZQS00297或ZQS00315,提示ZQS00297和ZQS00315有促进创伤记忆消退的潜能,进一步验证了调节LTP/LTD可促进创伤记忆消退,也为将ZQS00297和ZQS00315开发为防治PTSD的药物奠定了基础。结论:1.CORT致LTP/LTD损伤时,NMDA受体功能是降低的而非过度激活。2.单独改善LTP或LTD,同时改善LTP和LTD均可以促进创伤记忆消退,但同时改善LTP/LTD的效果更好。创伤环境后调节LTP/LTD,即记忆唤醒后改善LTP/LTD可以促进创伤记忆消退,与创伤应激后改善LTP/LTD效果一致。3.化合物ZQS00297和ZQS00315对创伤记忆的消退均有促进作用,具有进一步开发成治疗PTSD药物的潜能。
谢晶晶[4]（2021）在《分娩应激与促肾上腺皮质激素释放因子受体1信号互作对子代学习记忆的影响》文中指出目的阐明不同分娩应激水平下,促肾上腺皮质激素释放因子受体1（CRFR1）信号在调节子代经历生命早期应激后的学习记忆功能中的作用。方法（1）建立C57BL/6N小鼠剖宫产（CD）和阴道分娩（VD）模型。在产后第2天（PND2）-PND8通过减少筑巢材料建立生命早期慢性应激范式,在应激期间,将CD组仔鼠分别设为CRFR1拮抗组（CD+ANT）和溶剂对照组（CD+CON）,VD组仔鼠分别设为CRFR1拮抗组（VD+ANT）和溶剂对照组（VD+CON）。每天上午对CRFR1拮抗组颈后皮下注射盐酸安他拉明（antalarmin）,溶剂对照组注射注射溶剂。（2）在PND0、PND9、PND42分别记录四组仔鼠的体重和脑重。（3）在PND42（相当于青春期）对四组仔鼠进行旷场实验,评估各组仔鼠的运功能力。在PND44-PN49进行Morris水迷宫实验,评估仔鼠学习记忆功能。（4）在PND0、PND9、PND50收集仔鼠外周血,采用ELISA方法检测各组仔鼠不同时点外周血中皮质酮含量。在PND9、PND50收集仔鼠海马组织,Western Blot检测海马突触前标记物突触素（SYN）和突触后密度蛋白-95（PSD-95）、突触细胞黏附分子,包括神经链接蛋白1（NL1）、神经链接蛋白2（NL2）、神经丝束蛋白（NP）,nectin-1和nectin-3,以及N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体亚单位1（NR1）、2A（NR2A）和2B（NR2B）蛋白表达水平。结果（1）PND0、PND9、PND42时四组仔鼠体重、脑重差异均无统计学意义。（2）PND0时,CD组仔鼠血清皮质酮水平显着低于VD组仔鼠,差异有显着意义（9.1±2.1 ng/ml vs.46.3±3.5ng/ml,P=0.045）。PND9和PND50时,CD组和VD组中,拮抗剂注射组与溶剂对照组皮质酮水平差异均无统计学意义。（3）旷场实验中,CD+ANT组与CD+CON组相比、VD+ANT组与VD+CON组相比仔鼠的活动总距离、平均速度、大便粒数、中央区进入次数、中央区停留时间、站立次数及捋毛次数差异无统计学意义。（4）水迷宫前5天定位导航实验结果显示,拮抗剂处理和溶剂对照注射均不影响在CD组和VD组平均总路程、平均速度和平均潜伏期。第6天空间记忆探索实验结果显示,CD+ANT组仔鼠靶象限时间比显着高于CD+CON仔鼠,VD+ANT与VD+CON组间平均潜伏期、靶象限穿越次数和靶象限时间比差异均无统计学意义。（5）PND9时,CD+ANT组仔鼠SYP、NL1、nectin-1、nectin-3、NR2A、NR2B蛋白表达水平显着高于CD+CON组,VD+ANT组SYP、NL1、NL2、NP、NR1蛋白表达水平显着高于VD+CON组。PND50时,CD+ANT组仔鼠PSD-95、NL1、NL2、nectin-1、nectin-3、NR2A、NR2B蛋白表达水平显着高于CD+CON组,VD+ANT组NL2、nectin-1、NR1蛋白表达水平显着高于VD+CON组。结论剖宫产子代（低水平分娩应激）在经历生命早期慢性应激时,通过CRFR1拮抗可改善其青春期学习记忆功能,这种效应在阴道分娩子代（正常水平分娩应激）中不显着。
薛冰,王雪娇,马宁,高军[5]（2021）在《催产素调控心理韧性：基于对海马的作用机制》文中进行了进一步梳理心理韧性指个体面对逆境、挫折或重大威胁等应激情境下的有效且灵活适应的能力,促进机体恢复正常的生理和心理功能。研究表明海马是调控心理韧性的重要脑区,且催产素可能通过作用于海马增强心理韧性。海马内部环路内嗅皮层-齿状回-CA3可能调节恐惧记忆的泛化和消退以增强心理韧性;海马外部环路齿状回-杏仁核-伏隔核及海马-伏隔核环路调节情绪,可能分别通过促进奖赏和带来厌恶进而增强或降低心理韧性。催产素作用于海马增强心理韧性的可能途径有:催产素促进海马神经发生,降低海马腹侧成熟神经元对应激的敏感性,提高海马"模式分离"功能,降低应激记忆泛化;催产素恢复海马谢弗侧枝-CA1突触长时程增强,促进机体适应应激;催产素降低海马糖皮质激素受体水平,重新建立机体稳态。
张小云[6]（2021）在《早期负性经历影响大脑关键期发育以及成年行为的机制研究》文中研究说明发育阶段内的经历对于神经环路的形成以及维持大脑功能性的完整至关重要。在生命早期,尤其是大脑发育关键期,遭遇的一系列负性经历,会长远、持久地影响着个体的生长、发育以及成年后的健康、行为与精神状况。探究早期负性经历对个体发展的影响及神经生物学机制,一直是神经科学和精神卫生领域研究的热点问题之一。以往的研究报道更多关注于早期负性经历对成年大脑的影响,然而人们对早期负性经历对发育关键期大脑的影响却并不清楚。本研究中,我们选用了两种不同的动物实验模型,即幼鼠全麻暴露模型和早期母子分离模型,利用这两种动物模型分别模拟婴幼儿期手术全麻经历以及童年负性家庭经历。我们利用氯胺酮/甲苯噻嗪（KX）对P7幼鼠实行全麻暴露,结果表明,幼年全麻暴露不会直接导致成年时期焦虑行为;但是在成年时应用两种不同的轻度应激源来模拟“二次打击”情景,则会引起显着的应激性焦虑行为。在此模型中,我们发现,幼年全麻暴露干扰了海马区AMPA-沉默突触的发育去沉默过程,导致去沉默化的延迟以及突触去沉默介导的LTP受损。此外,幼年全麻暴露显着降低幼鼠脑中PKA活性。通过在麻醉过程中应用AMPA受体选择性激动剂增强神经活性,可以显着增强幼鼠脑中PKA激酶活性,逆转关键期内突触发育去沉默的延迟,有效挽救幼年全麻引起的应激性焦虑行为。在母子分离模型中,我们对P5小鼠采用了单一、长时程的24 h母子分离,通过行为学测试,发现早期母子分离导致小鼠成年时期行为异常,表现为焦虑样行为、认知障碍以及社交缺陷。此外,我们还发现早期母子分离显着地降低了幼鼠大脑中PKB活性。应用PKB高度选择性抑制剂干扰P5幼鼠大脑PKB活性,可以很好地模拟、重现母子分离导致的异常成年行为。电生理实验证实早期母子分离延迟关键期内海马区沉默突触发育去沉默;并且损伤了突触发育去沉默介导的LTP。在母子分离过程中,利用PKB特定激活剂进行相关干预,结果显示增强早期分离幼鼠大脑PKB活性可以逆转关键期内损伤的突触发育去沉默与LTP,很好地挽救母子分离导致成年时期的异常行为。本研究揭示了早期负性经历模型中PKA和PKB调控关键期大脑发育的重要作用,初步证明其活性调控关键期内沉默突触的发育去沉默过程,为揭示早期沉默突触发育影响成年脑功能提供新思路;此外,本研究还发现在关键期时提高神经元活性能很好地干预早期负性经历对大脑发育及功能的不良影响,也为精神疾病的及早干预与治疗提供新策略。
范卡敏[7]（2020）在《阿片μ受体介导急性应激后记忆提取损伤的研究》文中研究说明当机体经历强烈的急性应激或长期慢性应激时,学习记忆能力会受到显着影响,表现为学习记忆功能下降,甚至可能诱发多种精神疾病,如焦虑症、抑郁症和创伤后应激综合征等,其中应激对大脑中枢系统（如记忆中枢-海马）的损伤最为引人关注。已有研究表明,在应激时糖皮质激素升高,通过调节在海马CA1区兴奋性突触的可塑性,抑制长时程增强LTP的发生或促进长时程抑制LTD的产生而损伤记忆的提取。但是,排除糖皮质激素对海马的效应,并不能完全挽救应激造成的记忆提取损伤,说明还有其它神经机制参与。在急性应激状态下,会引起大脑中多种神经递质和神经调质与糖皮质激素共同作用,包括单胺类、内源性阿片肽（EOPs）,内源性大麻素,神经肽Y,催产素,和性激素等,对情绪与认知进行调节。其中,激活中枢神经系统的三类主要阿片类受体（包括μ,δ,和κ受体）,对认知、情绪、心血管和胃肠病学反应及对压力的适应性具有积极的调节作用。然而,内源性阿片肽系统是否在由应激导致的记忆提取损伤中发挥着重要作用,目前并不知道。因此本论文建立了 C57小鼠急性应激（高台,50min）后记忆提取损伤的实验模型,进一步利用脑立体定位手术、神经行为学、神经药理学、分子生物学和RNA原位杂交技术等手段对阿片μ受体介导的急性应激后记忆提取损伤进行系统性研究。结果发现:1.建立了一个两天周期的急性应激记忆提取损伤小鼠模型。水迷宫训练期12次（第一天,记忆获得）,水迷宫60s的测试期（第二天,记忆提取）前给予急性应激。结果表明急性应激可以导致小鼠记忆提取损伤,且至少维持2h。2.应激前的30min腹腔注射非选择性阿片受体拮抗剂naloxone,可以逆转应激后记忆提取的损伤,表明阿片受体在记忆提取损伤中发挥着重要的作用。随后,在海马CA1区微量注射阿片μ受体拮抗剂CATP可以显着减轻应激后记忆提取损伤,而微量注射阿片μ受体激动剂DAMGO后小鼠表现出与应激组相似的记忆提取受损现象。相反,海马CA1区微量注射阿片κ受体和阿片δ受体的拮抗剂后均没有影响。进一步,在海马CA1区微量注射脑啡肽抗血清后,也导致记忆提取损伤的恢复。上述结果充分说明海马区阿片μ受体与脑啡肽结合后被激活最终导致急性应激后小鼠记忆提取损伤。3.对全身性的和GABA能神经元、谷氨酸神经元以及星型胶质细胞上阿片μ受体基因敲除小鼠（共四种）分别进行了基因型鉴定和RNA原位杂交实验,结果表明全身性、GABA能神经元、谷氨酸神经元和星型胶质细胞上的阿片μ受体均分别被完全敲除。4.利用四种阿片μ受体基因敲除小鼠检测急性应激后小鼠记忆提取能力的改变,发现只有全身敲除阿片μ受体（μR-/-）和GABA能神经元上敲除阿片μ受体(μR（GABA-/-）小鼠能够逆转应激后的空间记忆提取能力损伤,说明GABA能神经元上阿片μ受体参与急性应激后记忆提取损伤。5.通过实验进一步验证,在急性应激后海马CA1区微量注射GABAA受体激动剂muscimol,发现该处理可以通过激活GABAA受体消除应激造成的记忆提取损伤。在急性应激后muscimol+L-655,708（突触外GABAA受体拮抗剂）联合给药,发现小鼠没有出现显着的记忆提取损伤,表明急性应激后海马CA1区GABA的释放减少,突触后膜GABAA受体介导的抑制性突触电流减弱,使局部兴奋-抑制失衡,最终将导致记忆提取损伤。综上所述,急性应激通过调控海马CA1区GABA能神经元上的阿片μ受体（与脑啡肽结合）功能,进而使得海马CA1区GABA的释放减少,导致海马CA1区局部兴奋-抑制失衡,最终造成记忆提取损伤。该研究为全面认识内源性阿片肽系统的生理功能以及有效干预学习记忆功能受损提供了新的理论依据和研究探索方向。
罗勇[8]（2019）在《海马在高温高湿应激致大鼠HPA轴功能紊乱中的作用及其药物干预研究》文中进行了进一步梳理目的:高温高湿是常见应激环境,严重影响人体健康。本研究通过人工气候箱模拟高温高湿环境构建高温高湿应激大鼠模型,从动物、组织、细胞及分子水平等多方面探讨高温高湿应激对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺（hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA）轴及海马结构和功能的影响,并采用糖皮质激素受体拮抗剂和清热利湿中药进行干预,观察药物对应激大鼠的效应,阐明海马在高温高湿应激致HPA轴功能紊乱中的作用机制,为寻找潜在的药物干预靶点提供理论依据。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组（中温高湿组、高温高湿组）、干预组（西药组、中药组）,每组20只,每组又再按实验时间分为3周组和6周组,每组10只。对照组大鼠饲养在温度（24±1）℃和湿度（50±5）%环境中,不给予任何刺激。其余各组分别每天暴露于相对湿度为（85±5）%范围内的人工气候箱模拟的高湿环境,中温高湿组模拟（30±1）℃,高温高湿组、西药组和中药组模拟（35±1）℃,持续4h,其余时间饲养环境与对照组相同,实验时间共计6周。中药组予以黄芩滑石汤灌胃,每只大鼠日用生药量8g/kg;西药组予以米非司酮溶液25mg/kg灌胃,给药容积为1ml/100g。采用Morris水迷宫实验检测空间学习和记忆能力;采用旷场试验检测探索和焦虑相关行为。ELISA法检测大鼠血清CRH、ACTH、CORT水平;HE染色观察肾上腺、垂体、下丘脑的形态学改变;RT-PCR检测下丘脑CRF mRNA基因表达;TUNEL检测海马细胞凋亡情况;免疫组化检测海马MR、GR、11β-HSD1、iNOS、TRPV1蛋白含量;原位杂交检测海马MR、GR、11β-HSD1、iNOS、TRPV1基因表达。结果:1、海马在高温高湿应激致大鼠HPA轴功能紊乱中的作用（1）Morris水迷宫实验3周时,中温高湿组、高温高湿组大鼠游泳总距离、寻找平台潜伏期较对照组明显增加;高温高湿组大鼠进入平台象限次数较对照组及中温高湿组明显减少;6周时,高温高湿组、中温高湿组大鼠游泳总距离、寻找平台潜伏期较对照组明显增加;中温高湿组进入平台象限次数较对照组及高温高湿组明显减少。（2）旷场试验3周时,中温高湿组大鼠静止与运动时间比较对照组明显减少;中温高湿组大鼠站立次数较对照组及高温高湿组增加。6周时,高温高湿组及中温高湿组大鼠静止与运动时间比较对照组明显减少。（3）ELISA检测3周时,高温高湿组及中温高湿组大鼠血清CRH、ACTH、CORT水平较对照组明显升高;高温高湿组大鼠血清ACTH较中温高湿组明显升高。6周时,高温高湿组及中温高湿组大鼠血清中CRH、ACTH、CORT水平与3周时趋势相仿。（4）HE染色观察下丘脑、垂体、肾上腺的形态学改变显示,下丘脑在3周时,中温高湿组有3例小胶质细胞增生,6周时模型组各有2例小胶质细胞增生和神经细胞异常改变。垂体在3周时各组未见明显变化,6周时,高温高湿组空泡变性较明显。肾上腺在3周时,高温高湿组3例皮质细胞肥大、排列紊乱、髓质毛细血管扩张,6周时程度加重。（5）RT-PCR检测3周时,高温高湿组大鼠下丘脑CRF基因表达较对照组明显升高,6周时,其仍表现为相仿趋势。（6）TUNEL检测3周时,高温高湿组大鼠海马细胞凋亡较对照组及中温高湿组明显上升,6周时,其表现趋势仍相仿。（7）免疫组化3周时,高温高湿组及中温高湿组大鼠海马MR、iNOS蛋白含量较对照组明显升高;高温高湿组大鼠海马GR蛋白含量较对照组明显升高。6周时,高温高湿组及中温高湿组大鼠海马MR、GR、iNOS蛋白含量较对照组明显升高。大鼠海马TRPV1、11β-HSD1蛋白含量3周时和6周时各组之间均无明显差异。（8）原位杂交3周时,高温高湿组及中温高湿组大鼠海马MR、GR、iNOS、TRPV1基因表达较对照组明显升高。6周时,其仍呈相仿表现趋势。大鼠海马11β-HSD1基因表达3周时和6周时各组之间均无明显差异。2、药物干预对高温高湿应激大鼠的影响（1）Morris水迷宫3周时,中药组大鼠游泳总距离、寻找平台潜伏期较高温高湿组明显减少;西药组、中药组大鼠进入平台象限次数较高温高湿组明显增加;6周时,中药组大鼠游泳总距离、寻找平台潜伏期较高温高湿组明显减少。（2）旷场实验3周时,中药组大鼠中心与外周时间比较高温高湿组明显增加。6周时其仍呈相仿表现趋势。（3）ELISA检测3周时,中药组及西药组大鼠血清CRH、ACTH、CORT水平较高温高湿组明显降低,6周时西药组大鼠血清CRH、ACTH、CORT水平与3周时趋势相仿。（4）下丘脑HE染色,中药组未见明显病变,西药组在3周时有3例小胶质细胞增生。垂体染色主要表现为细胞减少、排列稀疏、紊乱、部分胞质出现空泡,细胞形态较模糊。肾上腺在6周时较3周时病变稍重,主要表现在皮质束状带细胞排列紊乱、变性,炎细胞浸润,髓质毛细血管扩张。（5）RT-PCR检测3周时,西药组大鼠下丘脑CRF mRNA基因表达较高温高湿组明显降低,6周时其表现趋势与3周时相仿。（6）TUNEL检测3周时,中药组及西药组大鼠海马细胞凋亡较高温高湿组减少,但差异无统计学意义;6周时,西药组大鼠海马细胞凋亡较高温高湿组明显减少,差异有统计学意义。（7）免疫组化3周时,中药组及西药组大鼠海马GR蛋白含量均较高温高湿组明显降低,西药组大鼠海马MR、iNOS蛋白含量均较高温高湿组明显降低。6周时,中药组及西药组大鼠海马MR、iNOS蛋白含量均较高温高湿组明显降低,西药组大鼠海马GR较高温高湿组明显降低。大鼠海马TRPV1、11β-HSD1蛋白含量3周时和6周时各组之间均无明显差异。（8）原位杂交3周时,中药组及西药组大鼠海马MR、GR、iNOS基因表达均较高温高湿组明显降低。6周时,中药组及西药组大鼠海马MR、GR、iNOS基因表达与3周时趋势相同,中药组及西药组大鼠海马TRPV1基因表达较高温高湿组明显降低,海马11β-HSD1基因表达3周时和6周时各组之间均无明显差异。结论:1、高温高湿应激对大鼠行为学有明显影响,其改变主要体现在大鼠的学习能力下降、空间记忆力受损以及焦虑增加等方面。2、高温高湿应激导致HPA轴功能紊乱,可能与CRF mRNA基因表达在应激状态下增加相关,CRF表达增加继而导致CRH、ACTH以及CORT的升高,从而引起了异常的应激反应,最终出现HPA轴功能和病理形态学的改变。3、从模型应激后出现的行为学变化,HPA轴功能及病理改变,海马病理形态学改变,海马细胞凋亡增加等一系列变化来看,符合慢性应激致HPA轴持续亢进的特征,高温高湿应激动物模型的建立是成功的。4、海马在高温高湿应激致HPA轴功能紊乱中的作用机制可能是应激导致iNOS升高,NO生成增加,MR、GR失活,NO毒性增强,海马细胞凋亡增加,海马结构功能受损,减弱对HPA轴的负反馈调节,加重HPA轴功能紊乱,11β-HSD1、TRPV1可能不参与高温高湿应激损害。5、高温高湿应激所致HPA轴功能紊乱及海马损伤随时间进展有加重趋势,糖皮质激素受体拮抗剂和清热利湿中药可有效干预并各具优势。
王璐[9]（2019）在《基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用》文中研究表明目的:以自然衰老大鼠为研究对象,观察补肾方药（左归丸）、益气方药（益气聪明汤药）及两方合用（合剂）对老年大鼠空间学习能力,血清皮质酮含量,mi RNAFkbps-GR调控回路相关蛋白、表观遗传修饰酶与乙酰化修饰组蛋白的表达及学习记忆相关基因表达的影响,初步探索mi RNA-Fkbps-GR在自然衰老大鼠大脑海马分区的表达情况,为探索增龄性糖皮质激素的变化与学习记忆衰退的关系及中医补肾益气健脑、延缓学习记忆退化提供实验依据。方法:以自然衰老（23月龄）SD雄性大鼠为动物模型,随机分为老年对照组、老年左归组、老年益气组、老年合剂组和老年皮质酮（GC）拮抗组,另设青年对照组（同品系5月龄）。采用Morris水迷宫法观察各组大鼠记忆能力,ELISA法检测大鼠血清GC含量。免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜法观察各组大鼠大脑海马区表观遗传修饰相关酶蛋白Hdac2与Me CP2的共定位情况,免疫荧光法检测大鼠海马区与皮层区Fkbp5蛋白表达,免疫组化法检测Fkbp4蛋白表达,荧光定量PCR法及Western blotting检测大鼠糖皮质激素受体调控回路蛋白（GR,Fkbp5,Fkbp4,Dynein IC2）、表观遗传修饰酶（Dnmt1,Dnmt3a,Hdac2,Hat1）和学习记忆相关信号转导分子（Nptx2,Synapsin-1、Homer1）表达,Western blotting法检测乙酰化修饰组蛋白H4K5Ac,H4K12Ac表达情况,荧光定量PCR法检测mi R-124a与mi R-511的表达变化及各药物对老年大鼠上述各项指标异常变化的改善作用。结果:1.与青年对照组相比,老年大鼠学习记忆能力显着减退（P<0.05）,血清GC含量明显升高（P<0.05）,GR蛋白在大脑皮层与海马组织切片中荧光强度显着增强,表观遗传修饰酶Hdac2与Me CP2在海马神经元细胞核内共定位表达增多。海马总GR蛋白表达量与细胞核GR蛋白含量显着降低（P<0.01）,而细胞浆GR蛋白表达显着升高（P<0.01）,GR m RNA表达显着降低（P<0.001）,mi R-Fkbp5-GR调控回路中:动力蛋白Dynein IC2表达显着降低（P<0.001）、分子伴侣蛋白Fkbp5与Fkbp4蛋白表达显着升高（P<0.05）、Fkbp5基因m RNA表达显着升高（P<0.001）、mi R-511表达显着降低（P<0.001）、mi R-124a表达显着升高（P<0.001）,表观遗传修饰酶Hat1的基因表达（蛋白及m RNA）显着降低（P<0.05）、乙酰化修饰组蛋白H4K12Ac表达显着降低（P<0.05）、H4K5Ac无显着性变化、Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达显着增高（P<0.05）,学习记忆相关基因Nptx2、Synapsin-1基因表达显着降低（P<0.001）,Homer1基因表达无显着性变化。2.与老年对照组相比,补肾益气方药左归丸、益气聪明汤及拮抗剂RU38486均能不同程度的改善老年大鼠衰退的空间学习记忆能力、降低老年大鼠血清GC含量,减弱GR蛋白在大脑海马区与皮层组织切片中荧光强度,减少Hdac2与Me CP2在细胞核内的共定位表达。3.RU38486能够显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白、细胞浆GR蛋白（P<0.05）、GR m RNA（P<0.001）的表达,Hat1基因（P<0.01）、H4K12Ac蛋白的表达（P<0.001）,Nptx2蛋白（P<0.05）、Synapsin-1基因的表达（P<0.01）。同时RU38486可以显着下调Fkbp5、Dnmt1、Hdac2基因表达（P<0.05）,Dnmt3a m RNA（P<0.01）,mi R-124a表达（P<0.001）。而对Nptx2基因表达仅有上升趋势。对于Fkbp4蛋白、Dynein IC2蛋白等则无明显调整作用。4.左归丸还能显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白（P<0.001）、GR m RNA（P<0.001）、mi R-511表达（P<0.001）,Hat1基因表达（P<0.01）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时左归丸可以显着下调Fkbp4蛋白与mi R-124a表达（P<0.001）,Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达（P<0.01）。而对于细胞浆GR蛋白、Fkbp5蛋白等均无明显调整作用。5.益气聪明汤还能够显着上调老年大鼠海马细胞核GR蛋白（P<0.001）、mi R-511的表达（P<0.001）,Hat1 m RNA的表达（P<0.01）,H4K12Ac蛋白表达（P<0.001）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时益气聪明汤可以显着下调Fkbp5 m RNA（P<0.001）的表达,Dnmt1、Hdac2基因表达（P<0.01）。而对于Hat1蛋白的表达则有上调趋势,对于细胞浆GR蛋白、Dynein IC2等蛋白表达,均无调整作用。6.两方合剂（左归丸与益气聪明汤合剂）能够显着上调老年大鼠海马总GR蛋白、细胞核GR蛋白及细胞浆GR蛋白（P<0.05）、GR m RNA的表达（P<0.001）;Hat1基因表达（P<0.01）、H4K12Ac蛋白表达（P<0.001）,Nptx2、Synapsin-1基因表达（P<0.001）。同时两方合剂还可以显着下调Fkbp5基因表达（P<0.05）,Fkbp4蛋白表达（P<0.05）、mi R-124a表达（P<0.001）,Dnmt1、Dnmt3a、Hdac2基因表达（P<0.001）。而对于mi R-511表达、Dynein IC2蛋白的表达,两方合剂均无明显调整作用。结论:补肾益气方药左归丸、益气聪明汤主要是通过不同程度降低老年大鼠血清GC含量,调整mi R-Fkbps-GR回路相关基因m RNA表达,增高GR的核转位,降低海马组织表观遗传修饰酶（Dnmt1,Dnmt3a,Hdac2）的表达,增高组蛋白乙酰转移酶（Hat1）与乙酰化组蛋白H4K12Ac的表达,上调学习记忆相关基因（Nptx2、Snapsin-1）的表达,以抵抗高皮质酮对海马区域的毒性影响,进而发挥延缓学习记忆退化的作用。
韩诚[10]（2019）在《从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退的脑功能失衡机制》文中研究表明目的:研究衰老状态下学习记忆功能减退在脑不同层次阴阳失衡的表现和发生机制,初步阐明地黄饮子对衰老模型小鼠海马突触可塑性的作用机制,为补肾健脑法提供现代生物学依据。方法:采用理论探讨与实验研究相结合的方法。1、理论探讨:系统梳理中医学和现代医学对衰老及学习认知的认识,探讨从肾论治衰老学习记忆功能减退的可能性。2、实验研究:（1）实验分组:设正常对照组、衰老模型组、地黄饮子（低、中、高剂量）组和盐酸美金刚阳性药物组共计6组。其中,以6月龄雄性SAMP8小鼠作为衰老动物模型,以同月龄雄性SAMR1小鼠为正常对照,其他各组采用同月龄雄性SAMP8小鼠并给予药物干预。（2）给药干预:各组动物正常饮食条件喂养至5月龄后,从第6个月开始地黄饮子（低、中、高剂量）组小鼠分别每天灌胃不同浓度的地黄饮子水煎液（7.51g/kg·d、15.02g/kg·d、30.04g/kg·d）,盐酸美金刚组小鼠灌胃盐酸美金刚混悬液（3.03mg/kg·d）,正常对照组和衰老模型组动物小鼠灌胃等量溶媒。各组动物每天灌胃给药1次,连续1个月后,进行如下指标检测。（3）学习记忆能力评价:采用Morris水迷宫和新物体识别实验方法评价各组小鼠的空间学习能力、空间参考记忆力和新物体识别能力。（4）突触结构可塑性检测:采用透射电镜技术观察各组小鼠神经元和突触结构的形态变化。（5）突触功能可塑性检测:对各组小鼠海马内“schaffer侧枝-CA1区”突触回路进行在体场电位记录实验,观察LTP和LTD现象,评价突触传递效率。（6）海马神经递质检测:采用酶联免疫吸附实验方法检测各组小鼠海马组织谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的差异。（7）谷氨酸受体和钙调素依赖性蛋白激酶II的检测:采用蛋白免疫印迹法检测各组小鼠海马组织AMPAR2、NMDAR1、pNMDAR1、NMDA2A、pNMDA2A、NMDA2B、pNMDA2B、CaMKII、pCaMKII共9个蛋白的含量和磷酸化水平。结果:1.理论研究结果:基于“肾脑相关”理论,从经络联系、精髓关系、元神、肾志与脑神的关系,以及阴阳变化5个方面探讨了从肾论治衰老学习记忆功能减退的可能性;并且基于阴阳学说理论,认为现代脑科学相关研究成果都是阴阳之象,是对中医阴阳理论的丰富和扩展,用阴阳的思维模式去认识脑具有可行性。2.实验研究结果:（1）行为学检测结果:Morris水迷宫检测结果显示,与正常对照组相比较,衰老模型组小鼠空间学习记忆能力显着下降（P<0.05）;与衰老模型组相比,地黄饮子高剂量可以有效提升小鼠空间辨识和记忆提取能力,减少空间搜索时间（P<0.05）;新物体识别显示,与正常对照组相比较,衰老模型组小鼠记忆力受损（P<0.05）;与衰老模型组相比,地黄饮子高、中剂量均能使小鼠准确区分被更换的物体（P<0.05）,并增加其对新物体辨识的时间（P<0.01）。（2）在体场电位记录结果:快速老化的SAMP8小鼠的兴奋性突触后电位经过200Hz的高频刺激后增幅不明显,LTP效应明显低于相同月龄的抗老化SAMR1小鼠（P<0.001）,给予地黄饮子治疗后,则可以有效增强模型小鼠的LTP效应（P<0.05）。而在2Hz的低频刺激下,各组小鼠LTD的易化效应和EPSP的抑制程度具有明显的差异。与6月龄的快速老化SAMP8小鼠相比,相同月龄的抗老化SAMR1小鼠LTD效应仅在低频刺激后的小段时间内受到强化,随着时间流逝,其LTD易化现象逐渐恢复,突触后的兴奋性电位逐渐恢复正常（P<0.001）;给予地黄饮子治疗后,地黄饮子高剂量组小鼠的LTD效应也得到一定程度的恢复（P<0.05）。（3）透射电镜检测结果:通过透射电镜我们可以观察到,模型组小鼠的海马CA1区神经元细胞损伤、突触间隙增大或消失,突触前、后膜不清晰,突触小泡减少,突触后致密物质变薄;线粒体结构崩解,嵴断裂或溶解。给予地黄饮子灌胃治疗后,神经元细胞器损伤减少,突触结构得到修复。（4）ELISA检测结果:衰老模型组小鼠海马内Glu与GABA含量显着增加（P<0.001）,经过药物治疗后,各组小鼠海马内Glu与GABA含量均有所降低,尤其是地黄饮子高剂量组的Glu与GABA含量降低最明显（P<0.01）。（5）WB检测结果:SAMP8模型小鼠海马内AMPAR2、NMDAR1和NMDA2B的含量升高（P<0.05）,CaMKII含量降低（P<0.05）,pNMDAR1、pNMDA2A和pNMDA2B的含量增高（P<0.05）,pCaMKII含量降低（P<0.05）。运用地黄饮子治疗后,中剂量地黄饮子可以有效降低NMDAR1的蛋白含量（P<0.01）;高剂量地黄饮子可以有效增加CaMKII的蛋白含量和磷酸化程度（P<0.05）,降低AMPAR2、NMDA2B和pNMDA2B的异常表达（P<0.05）。结论:1.海马组织Glu和GABA含量增高、代谢失衡与衰老状态小鼠学习记忆功能减退有关;2.海马“schaffer侧枝-CA1区”突触回路的LTP/LTD效应失衡是衰老状态下学习记忆功能减退的脑电生理层面阴阳失衡的机制;3.海马神经细胞内钙离子超载是衰老状态下脑电生理和氨基酸神经递质层面阴阳失衡的关键因素。4.补肾方剂地黄饮子可通过调节神经细胞内钙离子浓度,抑制钙内流而易化神经突触可塑性,从而改善衰老小鼠的学习记忆功能。
二、有关应激及糖皮质激素影响海马LTP的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、有关应激及糖皮质激素影响海马LTP的研究进展（论文提纲范文）
（1）急性应激障碍向创伤后应激障碍发展模型的建立及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 急性应激障碍向创伤后应激障碍发展模型的建立 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 动物、仪器和耗材 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 足底电击模型的建立 |
| 1.4 旷场实验 |
| 1.5 创伤线索回避实验 |
| 1.6 情景恐惧实验 |
| 1.7 行为特征分析 |
| 1.8 血浆样本的收集 |
| 1.9 酶联免疫吸附法 |
| 1.10 统计学分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1 足底电击对小鼠焦虑样行为的影响 |
| 2.2 足底电击对小鼠主动回避行为的影响 |
| 2.3 足底电击对小鼠再体验行为的影响 |
| 2.4 足底电击模型小鼠应激障碍患病率分析 |
| 2.5 足底电击对小鼠血浆皮质酮的影响 |
| 3. 讨论 |
| 第二章 舍曲林和化合物297治疗给药对应激障碍发展影响的研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 动物、药品和仪器 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 足底电击模型的建立 |
| 1.4 旷场实验 |
| 1.5 创伤相关线索回避实验 |
| 1.6 情景恐惧实验 |
| 1.7 惊跳反射实验 |
| 1.8 行为特征分析 |
| 1.9 血浆和脑组织样本的收集 |
| 1.10 Western blot蛋白表达检测 |
| 1.11 酶联免疫吸附法 |
| 1.12 统计学分析 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 舍曲林和化合物297治疗给药对行为学和应激障碍发展的影响 |
| 2.2 舍曲林和化合物297治疗给药对血浆皮质酮水平的影响 |
| 2.3 舍曲林和化合物297治疗给药对海马区域NR2A、NR2B、BDNF和TrkB受体蛋白表达的影响 |
| 3. 讨论 |
| 第三章 NMDA受体功能对应激障碍发展影响的研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 动物、药品和仪器 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 行为学实验流程 |
| 1.4 旷场实验 |
| 1.5 创伤相关线索回避实验 |
| 1.6 情景恐惧实验 |
| 1.7 惊跳反射实验 |
| 1.8 血浆和脑组织样本的收集 |
| 1.9 行为特征分析 |
| 1.10 Western blot蛋白表达检测 |
| 1.11 酶联免疫吸附法 |
| 1.12 统计学分析 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 调节NMDA受体功能对行为学和应激障碍发展的影响 |
| 2.2 调节NMDA受体功能对血浆皮质酮水平的影响 |
| 2.3 调节NMDA受体功能对海马区域NR2A、NR2B、BDNF和TrkB受体蛋白表达的影响 |
| 3. 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附1、英文缩略词表 |
| 附2、综述 急性应激障碍发病机制和治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附3、攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（2）内源性大麻素系统在抑郁大鼠电休克后学习认知损伤中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 电休克对抑郁大鼠情绪、学习行为及内源性大麻素系统的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 抑制内源性大麻素系统对抑郁大鼠ECS后学习记忆功能和海马突触可塑性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 内源性大麻素系统在中枢疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果及学术论文 |
（3）调节LTP/LTD对创伤记忆消退的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 1 前言 |
| 1.1 应激和创伤后应激障碍概述 |
| 1.2 应激对认知功能影响及机制研究 |
| 1.2.1 应激激素和受体 |
| 1.2.2 应激对认知功能影响的机制 |
| 1.3 治疗创伤记忆药物的研究进展 |
| 2 CORT致 LTP/LTD损伤时NMDAR功能变化 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 实验材料与方法 |
| 2.3 .实验结果 |
| 2.3.1 CORT对正常小鼠背侧海马CA3-CA1 通路LTP/LTD的影响 |
| 2.3.2 抑制NMDA受体对CORT致 LTP/LTD损伤的作用 |
| 2.3.3 选择性抑制Glu N2A对 CORT致 LTP/LTD损伤的作用 |
| 2.3.4 选择性抑制Glu N2B对 CORT致 LTP/LTD损伤的作用 |
| 2.3.5 激动NMDA受体对CORT致 LTP/LTD损伤的作用 |
| 2.3.6 NMDA受体共激活剂与Glu N2B拮抗剂合用时对CORT致 LTP/LTD损伤的作用 |
| 2.3.7 阻断L-VDCC对 CORT致 LTP/LTD损伤的作用 |
| 2.4 小结 |
| 3 调节LTP/LTD对创伤记忆消退的影响 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 足底电击建立条件恐惧模型 |
| 3.3.2 创伤应激后调节LTP/LTD对创伤记忆消退的影响 |
| 3.3.3 创伤环境重现前调节LTP/LTD对创伤记忆消退的影响 |
| 3.3.4 创伤环境重现后调节LTP/LTD对创伤记忆消退的影响 |
| 3.4 小结 |
| 4 ZQS00297/ZQS00315 对创伤记忆消退的影响 |
| 4.1 研究背景 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 创伤应激后应用化合物ZQS00297和ZQS00315 对小鼠创伤记忆消退的影响 |
| 4.3.2 创伤环境重现后应用化合物ZQS00297和ZQS00315 对小鼠创伤记忆消退的影响 |
| 4.4 小结 |
| 5 讨论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（4）分娩应激与促肾上腺皮质激素释放因子受体1信号互作对子代学习记忆的影响（论文提纲范文）
| 英文缩略词表(Abbreviation) |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 剖宫产与儿童认知发育的关联 |
| 1.2 应激激素与子代认知功能的关联 |
| 1.3 应激、促肾上腺皮质激素释放因子受体1 信号与个体认知发育 |
| 1.4 突触相关蛋白在认知功能中发挥的作用 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 动物来源 |
| 2.2 动物模型的建立 |
| 2.3 仔鼠早期慢性应激及CRFR1 拮抗 |
| 2.4 行为学实验 |
| 2.5 仔鼠外周血皮质酮及海马突触相关蛋白检测 |
| 2.6 实验流程图 |
| 2.7 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 仔鼠生长发育情况 |
| 3.2 仔鼠外周血皮质酮水平 |
| 3.3 仔鼠行为学实验各指标的分布及差异 |
| 3.4 突触功能相关蛋白与受体 |
| 4 讨论 |
| 4.1 不同分娩方式子代的应激反应 |
| 4.2 分娩应激与CRFR1 信号互作对子代学习记忆的影响 |
| 4.3 分娩应激与CRFR1 信号互作对海马突触相关蛋白的影响 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 附录 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 应激、海马促肾上腺皮质激素释放激素与学习记忆 |
| 参考文献 |
（5）催产素调控心理韧性：基于对海马的作用机制（论文提纲范文）
| 1 海马调控心理韧性的内外部环路机制 |
| 2 催产素通过促进海马神经发生增强心理韧性 |
| 2.1 催产素促进海马神经发生 |
| 2.2 催产素特异性降低海马腹侧成熟神经元对应激的敏感性 |
| 2.3 催产素通过提高海马“模式分离”功能降低应激记忆泛化 |
| 3 催产素通过恢复海马突触可塑性异常增强心理韧性 |
| 3.1 催产素影响海马突触可塑性 |
| 3.2 催产素恢复应激抑制的海马突触长时程增强 |
| 4 催产素通过降低海马糖皮质激素受体水平增强心理韧性 |
| 4.1 应激提高海马糖皮质激素受体表达 |
| 4.2 催产素降低应激提高的海马糖皮质激素受体水平 |
| 5 总结与展望 |
（6）早期负性经历影响大脑关键期发育以及成年行为的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 关键期(Critical periods) |
| 1.1.1 关键期概念的提出 |
| 1.1.2 调控关键期发育的相关分子机制 |
| 1.1.3 关键期与精神疾病的干预和治疗 |
| 1.1.4 重启成年时期的“关键期” |
| 1.2 幼年全身麻醉 |
| 1.2.1 全麻暴露与氯胺酮(ketamine) |
| 1.2.2 幼年全麻暴露导致神经认知功能的改变 |
| 1.2.3 幼年全身麻醉导致形态学的改变 |
| 1.2.4 幼年全身麻醉引起神经毒性的分子机制 |
| 1.2.5 幼年麻醉动物模型的转化价值 |
| 1.3 早期母子分离 |
| 1.3.1 早期母子分离动物模型 |
| 1.3.2 早期母子分离调控大脑功能的分子机制 |
| 1.4 沉默突触 |
| 1.4.1 突触与沉默突触 |
| 1.4.2 沉默突触与LTP |
| 1.4.3 沉默突触与发育关键期 |
| 1.4.4 沉默突触与成熟神经系统 |
| 1.4.5 AMPA-沉默突触与大脑神经病理 |
| 1.5 蛋白激酶B(PKB) |
| 1.5.1 PKB的结构与分布 |
| 1.5.2 PKB的激活与失活 |
| 1.5.3 PKB的其他修饰调控 |
| 1.5.4 PKB相关信号通路 |
| 1.5.5 PKB生理学和病理学功能 |
| 1.5.6 PKB靶向治疗 |
| 1.6 本研究拟解决的问题 |
| 第二章 幼年全身麻醉对大脑关键期发育以及成年行为的影响 |
| 2.1 实验动物、试剂与仪器 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 幼鼠全麻暴露 |
| 2.2.2 行为学实验 |
| 2.2.3 轻度电击应激模型(ES) |
| 2.2.4 轻度约束应激模型(RS) |
| 2.2.5 电生理学记录 |
| 2.2.6 PKA激酶活性测定 |
| 2.2.7 应用软件 |
| 2.2.8 统计与分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 幼年全身麻醉对成年行为的影响 |
| 2.3.2 幼年全身麻醉扰乱关键期内沉默突触发育去沉默 |
| 2.3.3 CX546 对幼年全身麻醉的功能挽救 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 早期母子分离对大脑关键期发育以及成年行为的影响 |
| 3.1 实验动物、试剂与仪器 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 早期母子分离(Early maternal separation) |
| 3.2.2 动物行为学测试 |
| 3.2.3 蛋白质免疫印记 |
| 3.2.4 电生理学记录 |
| 3.2.5 应用软件 |
| 3.2.6 统计与分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 早期母子分离模型的建立与行为学检测 |
| 3.3.2 早期母子分离对幼鼠大脑激酶活性的影响 |
| 3.3.3 PKB在大脑中的时空表达模式 |
| 3.3.4 出生后早期药物干扰PKB活性导致成年行为异常 |
| 3.3.5 成年时期药物干扰PKB活性不会引起行为异常 |
| 3.3.6 早期母子分离扰乱关键期内突触发育去沉默 |
| 3.3.7 早期母子分离导致关键期内突触发育去沉默介导的LTP受损 |
| 3.3.8 早期SC79 药物干预逆转母子分离引起的关键期内突触发育异常 |
| 3.3.9 SC79有效地挽救早期母子分离导致的成年行为缺陷 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）阿片μ受体介导急性应激后记忆提取损伤的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 单位符号 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 应激 |
| 1.1.1 应激概述 |
| 1.1.2 应激的分类 |
| 1.2 应激与记忆的研究进展 |
| 1.2.1 记忆概述 |
| 1.2.2 应激与记忆 |
| 1.3 应激与阿片系统的研究进展 |
| 1.3.1 阿片系统概述 |
| 1.3.2 应激与阿片系统 |
| 1.4 应激、阿片系统和记忆间的研究进展 |
| 1.5 选题目的和意义 |
| 第2章 研究方法和内容 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验仪器和设备 |
| 2.3 实验试剂 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 急性高台应激 |
| 2.4.2 小鼠海马CA1区定位埋管手术 |
| 2.4.3 小鼠海马CA1区的微量注射 |
| 2.4.4 莫尔斯水迷宫 |
| 2.4.5 小鼠海马CA1区定位的准确性验证 |
| 2.4.6 阿片μ受体敲除小鼠注射他莫昔芬诱导 |
| 2.4.7 提取小鼠鼠尾DNA |
| 2.4.8 基因型鉴定 |
| 2.4.9 RNA荧光原位杂交 |
| 2.4.10 旷场测试 |
| 2.5 数据处理 |
| 第3章 急性应激后记忆提取损伤小鼠模型的建立 |
| 3.1 实验药品 |
| 3.2 实验分组 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 海马CA1区定位手术对小鼠的记忆获得和提取没有影响 |
| 3.3.2 急性应激会损伤小鼠记忆提取 |
| 3.3.3 急性应激后小鼠将维持长时间的记忆提取损伤 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 海马CA1区阿片系统在急性应激后记忆提取损伤中的作用 |
| 4.1 实验药品 |
| 4.2 实验分组 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 阻断阿片受体可以逆转小鼠急性应激后记忆提取损伤 |
| 4.3.2 海马CA1区选择性的阻断阿片μ受体可以逆转小鼠急性应激后记忆提取损伤 |
| 4.3.3 海马CA1区选择性的阻断阿片κ受体或阿片δ受体都对小鼠急性应激后记忆提取损伤没有影响 |
| 4.3.4 海马CA1区选择性的阻断β-内啡肽对小鼠急性应激后记忆提取损伤没有影响 |
| 4.3.5 海马CA1区选择性的阻断脑啡肽可以逆转小鼠急性应激后记忆提取损伤 |
| 4.3.6 海马CA1区微量注射脑啡肽的阻断剂对小鼠记忆提取没有影响 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 阿片μ受体敲除小鼠品系的筛选和鉴定 |
| 5.1 实验分组 |
| 5.2 实验结果 |
| 5.2.1 全身阿片μ受体敲除品系的基因型鉴定 |
| 5.2.2 全身阿片μ受体敲除品系的RNA原位杂交 |
| 5.2.3 GABA能神经元上阿片μ受体敲除品系的基因型鉴定 |
| 5.2.4 GABA能神经元上阿片μ受体敲除品系的RNA原位杂交 |
| 5.2.5 谷氨酸能神经元上阿片μ受体敲除品系的基因型鉴定 |
| 5.2.6 谷氨酸能神经元上阿片μ受体敲除品系的RNA原位杂交 |
| 5.2.7 星型胶质细胞上阿片μ受体敲除品系的基因型鉴定 |
| 5.2.8 星型胶质细胞上阿片μ受体敲除品系的RNA原位杂交 |
| 5.3 小结 |
| 第6章 不同细胞阿片μ受体特异性敲除对急性应激后记忆提取损伤的影响 |
| 6.1 实验分组 |
| 6.2 实验结果 |
| 6.2.1 全身敲除阿片μ受体可以逆转小鼠急性应激后记忆提取损伤 |
| 6.2.2 敲除GABA能神经元上阿片μ受体可以逆转小鼠急性应激后记忆提取损伤 |
| 6.2.3 敲除谷氨酸能神经元上阿片μ受体对小鼠急性应激后记忆提取损伤没有作用 |
| 6.2.4 敲除星型胶质细胞上阿片μ受体对小鼠急性应激后记忆提取损伤没有作用 |
| 6.3 小结 |
| 第7章 海马GABA能神经元功能在急性应激后记忆提取损伤中的作用 |
| 7.1 实验药品 |
| 7.2 实验分组 |
| 7.3 实验结果 |
| 7.3.1 阻断海马CA1区GABA_A受体将损伤小鼠记忆提取能力 |
| 7.3.2 选择性的阻断突触外GABA_A受体对小鼠记忆提取没有影响 |
| 7.3.3 海马CA1区微量注射高剂量的GABA_A受体激动剂muscimol将损伤小鼠记忆提取 |
| 7.3.4 海马CA1区微量注射低剂量的GABA_A受体激动剂muscimol可以逆转小鼠急性应激后记忆提取损伤 |
| 7.3.5 选择性的阻断突触外GABA_A受体并在海马CA1区微量注射低剂量的GABA_A受体激动剂muscimol后可以逆转小鼠急性应激后记忆提取损伤 |
| 7.4 小结 |
| 第8章 讨论 |
| 8.1 急性应激将增强阿片肽的释放 |
| 8.2 GABA能神经元上阿片μ受体介导急性应激后记忆提取损伤 |
| 8.3 海马CA1区GABA能神经元上阿片μ受体介导急性应激后记忆提取损伤 |
| 8.4 海马CA1区GABA能神经元上阿片μ受体的激活造成GABA的释放减少使得局部兴奋-抑制失衡导致了急性应激后记忆提取损伤 |
| 第9章 展望 |
| 第10章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 |
（8）海马在高温高湿应激致大鼠HPA轴功能紊乱中的作用及其药物干预研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 一、海马在高温高湿应激致大鼠HPA轴功能紊乱中的作用 |
| (一)材料与方法 |
| (二)结果 |
| (三)讨论 |
| (四)小结 |
| 二、中西药干预对高温高湿应激大鼠的影响 |
| (一)材料与方法 |
| (二)结果 |
| (三)讨论 |
| (四)小结 |
| 三、结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文情况 |
（9）基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试剂与药材 |
| 1.3 仪器与耗材 |
| 1.4 溶液配制 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 动物分组、饲养、造模及用药 |
| 2.2 制备中药复方制剂 |
| 2.3 取材 |
| 2.4 制备脑组织冰冻切片 |
| 2.5 Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力检测 |
| 2.6 ELISA法检测各组大鼠血清皮质酮(GC)含量 |
| 2.7 免疫荧光法检测各组大鼠海马GR分子伴侣蛋白Fkbp5蛋白表达 |
| 2.8 免疫组化法检测各组大鼠海马GR分子伴侣蛋白Fkbp4蛋白表达 |
| 2.9 免疫荧光双标结合激光共聚焦显微镜(CLSM)技术检测各组大鼠Hdac2、MeCP2蛋白在大脑海马神经细胞核内的共定位情况 |
| 2.10 Western blotting法检测各组大鼠海马组织GR调控回路蛋白GR Fkbp5、Fkbp4、Dynein IC2,表观遗传修饰酶Dnmt1、Dnmt3a、Hat1、Hdac2蛋白,乙酰化修饰组蛋白H4K12Ac、H4K5Ac,学习记忆相关蛋白Nptx2、Syn-1、Homer1的表达 |
| 2.11 F-Q-RT-PCR法检测各组大鼠海马组织GR调控回路基因GR、Fkbp5 mRNA,表观遗传修饰酶基因Dnmt1、Dnmt3a、Hat1、Hdac2 mRNA,学习记忆相关基因Nptx2、Syn-1、Homer1 mRNA的表达 |
| 2.12 Q-RT-PCR法检测各组大鼠海马组织miR-124a和miR-511的表达 |
| 2.13 数据统计分析方法 |
| 结果 |
| 1.各组大鼠学习记忆能力的变化 |
| 2.各组大鼠血清皮质酮(GC)含量变化 |
| 3.各组大鼠大脑海马分区和皮层Fkbp5蛋白的表达变化 |
| 4.各组大鼠大脑海马分区Fkbp4蛋白的表达变化 |
| 5.各组大鼠大脑海马分区GR、Fkbp5、Fkbp4和Dynein IC2蛋白与GR、Fkbp5 mRNA的表达变化 |
| 5.1 海马组织总GR蛋白、细胞浆GR蛋白与细胞核GR蛋白的变化 |
| 5.2 海马组织Fkbp5、Fkbp4和Dynein IC2蛋白表达的变化 |
| 5.3 海马组织GR和Fkbp5 mRNA的表达变化 |
| 6.各组大鼠大脑海马分区miR-124a和miR-511 的表达变化 |
| 7.各组大鼠Hdac2和MeCP2在大脑海马神经细胞核内的共定位情况 |
| 8.各组大鼠海马组织表观遗传修饰酶蛋白及其mRNA的表达变化 |
| 8.1 海马组织表观遗传修饰酶蛋白的表达变化 |
| 8.2 海马组织表观遗传修饰酶mRNA的表达变化 |
| 9.各组大鼠海马组织乙酰化修饰组蛋白的表达变化 |
| 10.各组大鼠大脑海马组织学习记忆相关基因mRNA及其蛋白表达变化 |
| 10.1 大脑海马组织学习记忆相关蛋白的表达变化 |
| 10.2 大脑海马组织学习记忆相关基因mRNA的表达变化 |
| 讨论 |
| 1. 老年大鼠学习记忆能力的变化及各类药物的干预作用 |
| 2. 各组大鼠大脑海马神经细胞miR-FKBP5-GR调控回路的变化 |
| 2.1 糖皮质激素及其受体(GC-GR)的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.2 Fkbp5/Fkbp4/动力蛋白调控GR入核的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.3 miRNA调控GR的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 2.4 小结 |
| 3. 表观遗传修饰与学习记忆调节的衰老性变化 |
| 3.1 DNA甲基化修饰与学习记忆的衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 3.2 组蛋白乙酰化修饰与学习记忆衰老性变化及各类药物的干预作用 |
| 3.3 小结 |
| 4. 中医对增龄性学习记忆能力减退的认识与经典方剂的使用 |
| 4.1 增龄性学习记忆减退的病因病机 |
| 4.2 数据发掘临床治疗增龄性学习记忆减退常用方药的使用规律 |
| 4.3 左归丸与益气聪明汤治疗增龄性学习记忆退化的理论依据 |
| 4.4 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录一:技术路线图 |
| 附录二:文献综述一 表观遗传修饰变化与学习记忆关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录三:文献综述二 分子伴侣蛋白Fkbp5对GC-GR调控学习记忆相关基因表达的影响 |
| 参考文献 |
| 附录四:已发表文章 |
| 附录五:在读期间参加学术会议情况 |
| 附录六:其他 |
（10）从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退的脑功能失衡机制（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 理论探讨 |
| 一、中医学对学习记忆功能的认识 |
| (一)“神”乃精神意识思维活动 |
| (二)五脏藏神协调认知过程 |
| (三)脑主元神启发灵机神明 |
| 二、中医学对衰老的认识 |
| (一)阴阳失衡而衰 |
| (二)五脏衰而寿尽 |
| (三)肾乃寿夭关键 |
| 三、从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退 |
| (一)经络不通,肾脑失联 |
| (二)肾精不足,脑髓不满 |
| (三)元气衰竭,神去机息 |
| (四)志无所藏,神无所化 |
| (五)阴阳失调,迷惑健忘 |
| 四、现代医学对学习记忆功能的认识 |
| (一)学习记忆活动的行为模式 |
| (二)学习记忆活动的结构基础 |
| (三)学习记忆活动的物质基础 |
| 五、现代医学对衰老的认识 |
| (一)基因功能紊乱与衰老 |
| (二)细胞自噬与衰老 |
| (三)氧化应激-炎症-免疫与衰老 |
| (四)与衰老相关的其他学说及认识 |
| 六、衰老与学习记忆功能的关系 |
| (一)相关脑区突触可塑性的改变 |
| (二)中枢神经递质的改变 |
| (三)离子通道通透性与功能的改变 |
| (四)激素水平的改变 |
| 七、从肾论治衰老肾虚状态下学习记忆功能减退 |
| (一)基于阴阳失衡探究学习记忆功能减退 |
| (二)运用地黄饮子从肾论治学习记忆功能减退 |
| 实验研究 |
| 实验一 地黄饮子对SAM小鼠学习记忆功能的影响 |
| 一、实验材料 |
| (一)实验动物 |
| (二)实验仪器 |
| (三)药品与试剂 |
| 二、实验方法 |
| (一)实验设计 |
| (二)主要试剂及药品配制备 |
| (三)行为学实验检测 |
| (四)在体海马场电位记录 |
| (五)海马组织样本采集、固定与制片方法 |
| (六)统计方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)地黄饮子对SAM小鼠空间学习记忆能力下降的改善作用 |
| (二)地黄饮子对SAM小鼠短期学习记忆能力下降的改善作用 |
| (三)地黄饮子对SAM小鼠海马突触结构可塑性的改善作用 |
| (四)地黄饮子对SAM小鼠海马突触功能可塑性的改善作用 |
| 四、讨论 |
| (一)地黄饮子参与调节学习记忆 |
| (二)地黄饮子参与调节海马突触可塑性 |
| (三)LTP/LTD效应失衡是衰老肾虚证脑电生理阴阳失衡的表现之一 |
| 五、小结 |
| 实验二 地黄饮子对SAM小鼠海马突触可塑性的作用机制研究 |
| 一、实验材料 |
| (一)实验动物 |
| (二)实验仪器 |
| (三)药品与试剂 |
| 二、实验方法 |
| (一)实验设计、分组情况及实验流程 |
| (二)主要试剂及药品配制 |
| (三)待测样本的收集与检测 |
| (六)统计方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)酶联免疫法检测海马内Glu、GABA含量 |
| (二)Western blot检测海马内谷氨酸受体、CaMKII的表达 |
| 四、讨论 |
| (一)兴奋性与抑制性氨基酸神经递质代谢失衡是脑内神经递质阴阳失衡的表现之一 |
| (二)衰老状态下脑不同层次阴阳失衡的关键在于钙离子代谢异常 |
| (三)地黄饮子可以有效调节衰老状态下的学习记忆能力下降 |
| 五、小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1.Master8 刺激器各阶段刺激模式程序 |
| 附录2.fEPSPs计算公式 |
| 附录3.各组小鼠海马透射电镜观察结果 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 论文着作 |
四、有关应激及糖皮质激素影响海马LTP的研究进展（论文参考文献）
- [1]急性应激障碍向创伤后应激障碍发展模型的建立及机制研究[D]. 王子元. 南京中医药大学, 2021(02)
- [2]内源性大麻素系统在抑郁大鼠电休克后学习认知损伤中的作用及机制研究[D]. 余健. 重庆医科大学, 2021(01)
- [3]调节LTP/LTD对创伤记忆消退的作用研究[D]. 于琪. 烟台大学, 2021(11)
- [4]分娩应激与促肾上腺皮质激素释放因子受体1信号互作对子代学习记忆的影响[D]. 谢晶晶. 安徽医科大学, 2021
- [5]催产素调控心理韧性：基于对海马的作用机制[J]. 薛冰,王雪娇,马宁,高军. 心理科学进展, 2021(02)
- [6]早期负性经历影响大脑关键期发育以及成年行为的机制研究[D]. 张小云. 东南大学, 2021(02)
- [7]阿片μ受体介导急性应激后记忆提取损伤的研究[D]. 范卡敏. 陕西师范大学, 2020(02)
- [8]海马在高温高湿应激致大鼠HPA轴功能紊乱中的作用及其药物干预研究[D]. 罗勇. 中国人民解放军海军军医大学, 2019(03)
- [9]基于Fkbps对老年大鼠GR核转位的影响探析学习记忆关键基因表达变化机制及补肾益气方药的作用[D]. 王璐. 上海中医药大学, 2019(02)
- [10]从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退的脑功能失衡机制[D]. 韩诚. 山东中医药大学, 2019(05)
标签：海马论文; 突触传递论文; 应激障碍论文; 肾上腺糖皮质激素论文; 科学论文;