一、缓激肽在大鼠尾动脉缩血管作用机制探讨（论文文献综述）
谢欣序[1]（2021）在《降香及替代药材对HMWD导致的微循环障碍的影响和其主治相关疾病作用机制的网络药理学探讨》文中研究指明目的:根据降香在中医药传统理论中其功能主治为化瘀止血、理气止痛的概述,本课题采用高分子右旋糖酐致大小鼠微循环障碍模型来对比降香及其替代药材交趾黄檀在化瘀止血方面功效的异同,并采用网络药理学来探讨降香功能主治相关疾病的作用机制,为交趾黄檀替代降香提供一定理论基础,以及为后续机制研究提供数据支撑。第一部分:降香及其替代药材抗高分子右旋糖酐导致的微循环障碍比较研究方法:将80只KM小鼠雄性按体重随机分为8组,每组10只,降香水提物高组（10g生/kg）,降香水提物低组（5g生/kg）,挥发油高组（10g生/kg）,挥发油低组（5g生/kg）,前列地尔组（0.75ug/kg）,血塞通（45mg/kg）,模型组,正常组,各组动物连续7天给予相应药物,每天一次;正常组尾静脉注射相同体积的生理盐水溶液;在实验过程中,每隔一天记录小鼠体重。第7天,水合氯醛400mg/kg麻醉小鼠,用剪刀剪去耳廓的细毛,耳廓微循环测量仪测小鼠耳廓小动脉及小静脉直径作为初始值,待小鼠苏醒后给药;给药1h后每只动物尾静脉注射10%HMWD溶液,5ml/kg;正常组尾静脉注射相同体积的生理盐水溶液;再次用水合氯醛400mg/kg麻醉小鼠,测造模后小鼠耳廓小动脉及小静脉直径。将120只SD大鼠雄性按体重随机分为10组,每组12只,降香水提高组（6g生药材/kg）、降香水提中组（3g生药材/kg）、降香水提低组（1.5g生药材/kg）、交趾水提高组（6g生药材/kg）、交趾水提中组（3g生药材/kg）、交趾水提低组（1.5g生药材/kg）、血塞通组（30mg/kg）、前列地尔组（0.45ug/kg）、模型组、正常组,各组动物连续7天给予相应药物,给药1h后除正常组外每只动物尾静脉注射用生理盐水溶液配制的10%HMWD溶液,10ml/kg,正常组尾静脉注射相同体积的生理盐水溶液。第7天,采用水合氯醛300mg/kg麻醉大鼠,测第7次注射HMWD前后大鼠肠系膜微血管直径并记录微血管红细胞流速,采用powerlab记录各组动物心电及左颈动脉压。检测后对各组动物进行腹主动脉采血,检测其血液流变学指标,全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、红细胞变形指数、血小板数;对各组动物进行肺部拍照,并对肺部组织进行出血点及瘀血进行评分,检测各组动物血清中NO、ET-1、TXB2、6-keto-PGF1-α、PAI-1和t-PA含量,另外检测各组动物血清中AST、CK-MB、LDH、CK含量。结果:1、一般观察:小鼠实验中,前列地尔组体重较模型组体重有下降,但无显着性差异,其他给药组动物与模型组比较无明显差异;大鼠实验中,各给药组动物与模型组比较体重无明显差异;提示降香水提物、降香油、交趾黄檀水提物对大小鼠体重无明显影响。2、小鼠耳廓微循环小血管变化:小鼠尾静脉注射右旋糖酐后,小鼠耳廓中小静脉直径较给药前明显下降,小动脉直径下降不明显,模型组小鼠耳廓动脉比造模后明显升高,降香油高低组、降香水提物高组、交趾黄檀高低组小静脉直径与模型组比较下降不明显,动静比差值显着性下降。3、肺脏表观出血评分结果:对各组大鼠进行肺脏表观观察,发现模型组肺脏与正常组比较可见陈旧的点状及片状瘀血斑点,各给药组情况较模型组点状及片状瘀血斑点较模型组少,进行评分,降香水提高、中组、交趾黄檀水提高组评分较模型组明显下较,显示降香及交趾黄檀水提物能改善大鼠肺部瘀血情况4、肠系膜微血管直径及红细胞流速结果:从肠系膜微血管直径变化来看,第7次注射高分子右旋糖酐前后肠系膜微血管直径有较小上涨的趋势。其中降香高剂量组、降香低剂量组、交趾高剂量组有与模型组比较其为血管直径升高,且有显着性差异。从微血管红细胞流速来看,第7次注射高分子右旋糖酐后,模型组与正常组比较其红细胞流速明显下降,降香高组、降香中组与模型组比较,其红细胞流速较明显升高,交趾高组、交趾中组与模型组比较,其红细胞流速较明显升高。5、血流动力学指标与血液流变学指标:心电方面,模型组和正常组比较,T波高耸,T-S值,T/R值明显升高,降香高、中组、交趾高组与模型组比较,其T-S值,T/R值明显下降。左颈动脉压,模型组与正常组比较无明显差异,各给药组左颈动脉压与模型组比较无明显。6、血液流变学指标:降香高、中组,交趾高、中组能够明显降低全血黏度（高切、中切、低切）;降香高组、交趾高、中组能够明显降低红细胞聚集指数。7、血清中舒张血管及纤溶指标检测:降香高、中组,交趾高组能够明显提高血清中NO含量,降香高组、交趾高、中组明显降低血清中ET-1含量。交趾高组能明显降低血清中TXB2含量,降香高组、交趾高组能明显升高血清中6-keto-PGF1-α含量;降香高组、交趾高组能明显升高TXB2/6-keto-PGF1-α含量。降香及交趾黄檀对血清中PAI-1和t-PA含量无明显影响8、降香及交趾黄檀具降低血清中AST、CK-MB、LDH、CK含量的趋势。第二部分:基于网络药理学探讨降香功能主治相关疾病的作用机制方法:利用TCMSP、TCMID和BATMAN-TCM数据库分析降香中的有效活性成分,获取降香有效成分的作用靶点。利用Gene Card、OMIM、Dis Ge NET数据库和GEO基因芯片整合NASH、AMI、动脉粥样硬化（vascular disease）的作用靶标。运用STRING数据库构建蛋白质相互作用网络（PPI）,采用Cytoscape 3.8.0软件构建药物活性成分-疾病-靶点网络模型进行分析,借助Matescape和DAVID在线工具对关键靶点进行基因本体功能注释（GO）和东京基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,并用SYBYL2.0软件对HUB基因进行分子对接验证,采用HPA数据库分析关键靶标蛋白在人体不同组织和细胞中的表达水平。结果:1、降香中37种有效活性成分的预测靶标有105个,GO分析表明,降香可参与多种生物学过程,尤其是对血液循环以及细胞膜电位的调节,其中79个靶点与NASH、AMI和vascular disease相关,共同靶点22个。2、基于22个共同靶点构建降香靶点与NASH、AMI和vascular disease共同靶点的相互作用网络（PPI）和GO、KEGG富集分析,确定了CASP3、MAP K14、PTGS2、PPARG和HMOX1等关键靶点,表明降香有效成分主要作用在细胞的膜筏、胞质溶胶、质膜、细胞核和核质,参与缺氧反应,雌二醇反应,信号转导,细胞增殖等生物过程,影响调控血清素激活的突触,钙信号通路,Erb B信号通路,HIF-1信号等相关通路,3、分子对接结果显示降香中β-谷甾醇、阔叶黄檀酚、消旋的异剑叶莎属异黄烷和牛角花酮等关键化合物与CASP3、MAPK14、PTGS2、PPARG等关键靶点有较好的结合能力。结论:1、降香及交趾黄檀对大小鼠体重无明显影响,降香及交趾黄檀具有扩张小鼠耳廓微血管作用,降香及其替代药材交趾黄檀能够明显增加肠系膜微血管的血液红细胞流速,降香及交趾黄檀能够明显改善肺脏表面出血情况,降香及交趾黄檀能够降低T-S值,T/R值,全血黏度,红细胞聚集指数;降香及交趾黄檀能够提高血清中NO含量并降低ET-1含量;另外降香及交趾黄檀也能够提高血清中6-keto-PGF1-α含量并降低TXB2含量。2、本研究以中药降香活性成分为研究对象,通过网络药理学的手段分析了其作用NASH、AMI和Vascular disease可能的共同靶标及途径机制,建立“化合物-靶标-通路-疾病-分子对接”的中药网络药理学研究模式,从多个角度揭示了降香通治疗NASH、AMI和Vascular disease的调控网络。从分析结果来看降香中的各活性成分组要涉及的靶点有CASP3、MAPK14、PTGS2、PPARG和HMOX1,主要作用在细胞的膜筏、胞质溶胶、质膜、细胞核和核质,参与缺氧反应,雌二醇反应,信号转导,细胞增殖等生物过程,影响调控血清素激活的突触,钙信号通路,Erb B信号通路,HIF-1信号等相关通路。
王耀振[2]（2021）在《基于血管紧张素转化酶2探究人参皂苷Rc改善内皮细胞胰岛素抵抗与血管内皮功能障碍的作用及机制》文中研究说明二型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）是全球范围内的主要健康问题,其对血管可产生严重的危害作用,即糖尿病血管病变,这也是导致T2DM患者致残致死的主要原因。胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）作为T2DM的典型特点,不仅是促进其发生发展的关键因素,还是代谢综合征导致内皮功能障碍的重要原因。内皮是血管的第一道屏障,承担多种自分泌、旁分泌和内分泌功能,而内皮功能障碍是血管功能障碍的早期致病事件,其与IR相互促进,共同在糖尿病心血管并发症中发挥了重要作用。肾素血管紧张素系统（renin-angiotensin system,RAS）是一种具有内分泌特点的肽能系统,主要负责维持血压和水电解质的平衡,其中血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）/血管紧张素II（angiotensin II,Ang II）/血管紧张素1型受体（angiotensin type 1 receptor,AT1R）轴在糖尿病及其并发症的发生发展中起到了重要作用,该轴的关键效应分子-Ang II,参与多种病理生理过程,包括氧化应激、炎症反应、纤维化、肥大和内皮功能障碍等。血管紧张素转化酶2（angiotensin-converting enzyme 2,ACE2）/血管紧张素1-7[angiotensin-（1-7）,Ang-（1-7）]/Mas轴拮抗了ACE/Ang II/AT1R轴的功能,其保护作用不仅依赖于对Ang II的降解,还依赖于生成Ang-（1-7）作用于Mas所产生的抗氧化、抗炎、抗肥大、血管舒张及改善内皮功能障碍等作用。尽管有研究表明ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴可改善代谢IR,并且Ang-（1-7）可改善db/db小鼠内皮功能障碍和Ang II诱导的内皮细胞IR,但ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴与内皮IR的相关研究仍鲜有报道,因此进一步研究其与内皮细胞IR的关系有助于深入理解IR的分子机制,从而以新的角度防治糖尿病心血管并发症。人参皂苷Rc是原人参二醇组皂苷的单体成分并且是人参皂苷的主要成分之一,有关人参皂苷Rc药理活性的研究相对较少,仅有少数研究报道了其具有强大的抗炎和抗氧化活性,而人参皂苷Rc对糖尿病心血管并发症是否具有潜在的保护作用尚不清楚。其同分异构体人参皂苷Rb2与人参皂苷Rb3已被证实具有显着的心血管保护作用,并且还有研究表明了人参皂苷与RAS具有密切关系。鉴于炎症和氧化应激是导致IR的关键机制以及ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴在心血管疾病中的重要保护作用,我们推测人参皂苷Rc可能通过激活ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴改善内皮IR与内皮功能障碍,故开展此研究对其进行初步验证。我们首先应用高糖（high glucose,HG）建立了人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）IR模型（30 mmol/L D-葡萄糖处理24 h）。实验结果显示,HG对HUVECs的存活率和形态无明显影响;HG可显着降低HUVECs的NO分泌含量并升高ET-1 mRNA水平,提示其破坏了血管舒缩因子的平衡;HG可显着降低HUVECs的p-IRS1Tyr896、p-PI3K p85Tyr607、p-Akt Ser473及p-eNOSSer1177水平并升高p-IRS1Ser307水平,提示其损害了胰岛素信号转导;HG可显着减少HUVECs的ACE2及Mas蛋白表达,提示其可能损害了ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴的保护作用。以上结果表明HG成功诱导HUVECs IR并可减少ACE2及Mas蛋白表达。我们进而加入人参皂苷Rc（25、50 mmol/L）与HG同步处理,观察其对HUVECs IR是否具有改善作用。实验结果显示,人参皂苷Rc可显着升高HUVECs的NO分泌含量并降低ET-1 mRNA水平,提示其纠正了血管舒缩因子的失衡;人参皂苷Rc可减少HUVECs的ROS产生,显着降低培养液上清MDA含量并升高SOD活性,提示其增强了HUVECs的抗氧化应激能力;人参皂苷Rc可显着降低HUVECs的TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA水平,提示其增强了HUVECs的抗炎能力;人参皂苷Rc可显着降低HUVECs培养液上清Ang II含量,进一步升高Ang-（1-7）含量,增加ACE2及Mas蛋白表达,而HG或人参皂苷Rc对ACE2及Mas mRNA水平无明显影响,提示人参皂苷Rc可通过非转录调控方式激活ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴;人参皂苷Rc可显着升高HUVECs的p-IRS1Tyr896、p-PI3K p85Tyr607、p-AktSer473及p-eNOSSer1177水平并降低p-IRS1Ser307水平,提示其恢复了胰岛素信号转导;人参皂苷Rc可显着减少NOX2蛋白表达,降低p-IKKβSer177/181、p-JNKThr183/Tyr185及p-NF-κB p65Ser536水平,提示其抑制了IR相关的氧化应激和炎症信号。以上结果表明,人参皂苷Rc可能通过抗氧化、抗炎和上调ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴改善内皮IR。为进一步明确人参皂苷Rc改善内皮IR的潜在机制,我们应用ACE2特异性抑制剂MLN-4760（100 nmol/L）与HG及人参皂苷Rc同步处理。实验结果显示,MLN-4760可显着抑制人参皂苷Rc纠正血管舒缩因子失衡、抗炎、激活ACE2/Ang-（1-7）/Mas轴、恢复胰岛素信号转导及抑制IR相关氧化应激和炎症信号的作用;然而,MLN-4760未能抑制人参皂苷Rc减少HUVECs的ROS产生、降低培养液上清MDA含量并升高SOD活性的作用,提示人参皂苷Rc具有独立于ACE2的抗氧化应激能力。以上结果表明,人参皂苷Rc的抗氧化及抗炎作用一定程度上依赖于上调ACE2,并且其通过上调ACE2改善了内皮IR。基于体外实验结果,我们应用T2DM模型的db/db小鼠和MLN-4760,进一步观察人参皂苷Rc是否对在体的内皮功能障碍同样具有改善作用及其机制是否同样依赖于上调ACE2。实验结果显示,人参皂苷Rc对db/db小鼠体重、空腹血糖、血清脂质（TC、TG、LDL-C、HDL-C）及胰岛素含量无明显影响,提示其无降血糖及调血脂的作用;人参皂苷Rc可显着降低db/db小鼠血清TNF-α含量,提示其在体内同样具有抗炎作用,而这种作用被MLN-4760显着拮抗;人参皂苷Rc对db/db小鼠血清Ang II、Ang-（1-7）及主动脉Ang-（1-7）含量无明显影响,但可显着降低主动脉Ang II含量并增加ACE2及Mas蛋白表达,提示其在体内同样可上调ACE2及Mas,而这种作用被MLN-4760显着拮抗;人参皂苷Rc可显着改善db/db小鼠胸主动脉内皮依赖性舒张并恢复Akt/eNOS信号转导,提示其在体内可改善内皮功能,而这种作用被MLN-4760显着拮抗;人参皂苷Rc可显着减少db/db小鼠主动脉NOX2及NOX4蛋白表达,提示其在体内同样具有抗氧化作用,而MLN-4760可一定程度拮抗这种作用。以上结果表明,人参皂苷Rc可改善db/db小鼠主动脉内皮功能障碍,其机制可能更依赖于降解Ang II而不是生成Ang-（1-7）,且不依赖于对血糖和血脂的调节。综上所述,本研究从细胞水平和整体动物水平上,证实了人参皂苷Rc可通过上调ACE2蛋白改善HUVECs IR及db/db小鼠内皮功能障碍,不仅发现了人参皂苷Rc的新作用及其潜在机制,还为防治糖尿病心血管并发症提供了新的视角。
肖滢[3]（2021）在《可溶性鸟苷酸环化酶激动剂Vericiguat靶向调控AMPK/mTOR及自噬通路抑制病理性心肌肥厚的机制研究》文中研究说明目的:心肌肥厚是导致心力衰竭的重要危险因素。心衰及心肌肥厚过程中NO-sGC-cGMP信号通路功能明显受损,使得机体cGMP含量显着降低。干预NO-sGC-cGMP通路有望成为未来治疗心肌肥厚的潜在治疗靶点。近年来,一种新型的口服长效可溶性鸟苷酸环化酶sGC刺激剂Vericiguat已在心血管疾病治疗领域崭露头角。本研究旨在明确新型sGC激动剂Vericiguat在心肌肥厚中的保护作用,为心力衰竭、肥厚型心肌病及病理性心肌重塑的防治提供一定的理论基础。方法:本研究分为体外部分和体内部分,（一）体外部分:通过AngⅡ刺激建立H9c2心肌细胞肥厚模型,通过CCK-8法确定Vericiguat合适的作用浓度;然后使用流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、RT-PCR、western blot检测Vericiguat干预对心肌细胞肥厚、凋亡、活性氧产生以及自噬等信号通路蛋白的作用,进一步通过计算机模拟反向分子对接筛选并验证Vericiguat的潜在靶标。（二）体内部分:使用1.44mg/kg/d剂量浓度的AngⅡ微量缓释泵皮下给药28天,建立小鼠心肌肥厚模型。选取8-10周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:生理盐水缓释泵灌注组（Saline组）,Vericiguat 灌胃组（Ver 组,30mg/kg/d）,AngⅡ缓释泵灌注组（AngⅡ组,1.44mg/kg/d）,AngⅡ缓释泵灌注和Vericiguat灌胃组（AngⅡ+Ver组）。通过酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜、组织病理学染色、心脏超声、RT-PCR和Western blot检测小鼠血流动力学、心肌肥厚及间质纤维化水平,氧化应激程度和自噬等信号通路蛋白的改变水平,从而系统评估心肌肥厚时心脏病理性重塑情况。同时通过生物信息学方法分析小鼠心室组织RNA-Seq数据,评估Vericiguat干预心脏肥厚时相关通路调控状态的改变。结果:（一）Vericiguat（10μM）干预处理可显着抑制AngⅡ刺激诱导的H9c2心肌细胞肥大,降低细胞ROS产生,减少心肌细胞凋亡;并通过增加细胞内抗氧化物酶HO-1和SOD蛋白的表达,促进心肌细胞自噬过程,保护心肌细胞。基于放射免疫分析的临近闪烁分析法结果显示,Vericiguat对PDE4D（IC50,6.184μM）和PDE5A（IC50,2.584 μM）均有抑制作用。（二）在Ang Ⅱ诱导的小鼠心肌肥厚损伤模型中,Vericiguat可以显着降低小鼠收缩压、舒张压,改善心肌肥厚与心脏纤维化;抑制VASP、AMPK和mTOR的磷酸化,促进自噬相关蛋白Atg3,Atg5,Beclin-1,LC3Ⅱ/Ⅰ的表达和抗氧化应激系统HO-1/SOD蛋白的表达。使用Vericiguat干预后,可以有效减轻心肌组织氧化应激水平、减少心肌间质纤维化和血管周围纤维化。此外,Vericiguat可分别通过AMPK/mTOR依赖的信号通路及自噬通路保护心脏功能。使用心肌转录组测序技术联合基因集富集分析（GSEA）Vericiguat可以通过调节氧化应激、细胞外基质降解重排、氧化磷酸化、细胞增殖、细胞周期和AMPK/mTOR等关键信号通路,抑制小鼠心肌病理性重构,改善心脏功能。结论:利用体内实验、体外实验发现Vericiguat可以靶向调控AMPK/mTOR和细胞自噬通路,改善心肌肥厚及心脏病理性重塑过程,为研究NO-cGMP-sGC信号通路在心肌重构中的作用提供了新的线索。Vericiguat在改善心室重构的同时,还可减少氧化应激和活性氧的产生,为心肌重构的防控提供新思路。
何可[4]（2021）在《高盐环境下内皮素受体介导的冠状动脉平滑肌损伤的机制研究》文中研究指明背景高盐饮食是高血压发生发展的关键性因素,高盐环境引起的冠状动脉张力功能障碍的机制尚不清楚。以往的研究表明,冠状动脉痉挛往往是由内皮素-1（endothelin-1,ET-1）和血栓环素（thromboxane A2,TXA2）引起的,会促进血管纤维化导致心肌缺血。高盐饮食可能会引起神经体液因素通过冠脉内受体机制影响血管张力,表达于冠脉平滑肌层的内皮素受体可能关键性的介导了冠脉的收缩,其上游调节因素包括内源性内皮素和血栓环素,可激活内皮素受体介导的IP3受体-SOCE信号通路。钙库操纵的钙内流(store-operated Ca2+entry,SOCE)保持内质网Ca2+的稳态,是维持血管平滑肌收缩功能的重要环节。然而,高盐和高血压状态会引起动脉重构主要表现为血管中膜层纤维化,血管平滑肌细胞（VSMCs）会进行表型转化,并可能导致SOCE作用失衡而影响冠脉血管张力。因此,本研究分别通过在体内建造高盐饮食动物模型和体外模拟细胞外高盐环境,探讨高盐环境下冠状动脉收缩张力变化及机制,为高盐高血压相关缺血性心脏病临床治疗提供新的思路。目的探讨高盐饮食大鼠及细胞外高盐环境下内皮素受体介导的大鼠冠状动脉平滑肌收缩功能的变化及其机制。方法本研究在体内建造4%高盐饮食4周大鼠模型,分为正常饮食组及高盐饮食组,用无创血压系统测量大鼠的收缩压水平,用ELISA实验测定大鼠血清中ET-1浓度,采用二维M型超声心动图测量大鼠心脏结构,评估心脏射血功能,急性分离大鼠冠状动脉并去除内皮后,用离体血管张力实验检测U46619、ET-1和SOCE诱导的冠脉平滑肌收缩功能,并分别通过蛋白质免疫印迹及免疫组化实验检测IP3R-SOCE信号通路相关蛋白ETA、ETB、IP3R、STIM1和Orai1在大鼠冠状动脉平滑肌中的表达水平,用Masson染色和天狼星红染色检测大鼠冠状动脉平滑肌中胶原分布及表达情况;在体外分别用不同浓度高盐培养大鼠离体冠状动脉24 h,分为正常盐培养组（137.65 m M[Na Cl]）及高盐培养组（147.65–167.65 m M[Na Cl]）,用离体血管张力实验按上述方法检测冠脉平滑肌收缩功能,用免疫组化实验检测上述IP3R-SOCE信号通路相关蛋白表达水平,用钙成像检测高盐培养的大鼠冠脉平滑肌细胞中SOCE诱导的Ca2+内流情况。结果4%高盐饮食4周使大鼠血压升高,血清ET-1浓度升高,心脏室间隔及左室后壁明显增厚,心率增加,冠脉平滑肌层I型胶原蛋白表达增加,I/III型胶原比值增加,表明高盐饮食大鼠冠脉发生纤维化表现,高盐饮食大鼠冠状动脉平滑肌中内皮素受体介导的IP3R-SOCE信号通路相关蛋白ETA、ETB、IP3R、STIM1和Orai1表达下调,由ET-1、U46619及SOCE诱导的高盐饮食大鼠冠状动脉平滑肌收缩功能下降;而体外高盐培养后大鼠冠状动脉平滑肌IP3R-SOCE途径相关蛋白表达水平增强,SOCE诱导的Ca2+内流增强,冠脉平滑肌收缩功能增强。结论体外高盐培养后,细胞外高钠环境使大鼠冠状动脉平滑肌中内皮素受体介导的IP3R-SOCE途径ETA、IP3R、STIM1和Orai1蛋白表达水平升高,导致冠状动脉平滑肌收缩功能增强,而短期高盐饮食后大鼠血压升高、血清ET-1含量上升导致冠脉纤维化,引起的上述IP3R-SOCE途径相关蛋白水平下调推测为代偿性机制,并进一步导致冠状动脉平滑肌收缩功能下降,但随着病程迁延最终可能失代偿。
王瑶瑶[5]（2020）在《双清平化方对MS大鼠血压及IR、ACE、AngⅡ的影响》文中研究表明目的通过双清平化方对代谢综合征（MS）模型大鼠的干预,观察其对血压、血清NO、ET-1、AngⅡ及胰岛素抵抗的影响,明确其降压作用,探讨该方药降压的分子机制,为代谢综合征临床治疗提供实验依据。方法1 60只4周龄、体重140～160g的雄性SD大鼠,随机选取6只作为正常组,普通饲料及纯水喂养,其它54只由高脂饲料+10%果糖水喂饲,实验11周时予L-NAME 20mg/kg/d灌胃2周,实验第13周予STZ 25mg/kg一次性腹腔注射诱导MS模型,至14周末造模结束,评估造模情况。2造模结束将符合成模标准的30只MS大鼠随机分为模型组（MSD组）、缬沙坦组（VC组）、双清平化方高（SPHD-H组）、中（SPHD-M组）、低剂量组（SPHD-L组）各6只。各治疗组分别予缬沙坦（7.2mg/kg/d）、双清平化方高（13.38g/kg/d）、中（6.93g/kg/d）、低剂量（3.47g/kg/d）的含药饲料。给药8周后处死大鼠,评估血压等基础指标治疗期间的变化情况;检测血清FBG、FINS以及NO、ET-1、AngⅡ观察治疗后各项指标的变化;HE及Masson染色观察主动脉的病理变化;Weston blot检测肾脏组织ACE、AT1R、AT2R蛋白的表达。采用SPSS 26.0统计软件进行数据的统计分析。结果1造模第14周时,造模组血压、体重、腹围、Lee’s指数、血糖较正常组明显升高,差异显着,具有统计学意义（P<0.05）。2药物干预8周后结果显示:在肥胖相关指标方面,与模型组相比,双清平化方高、中剂量组体重、腹围、Lee’s指数均明显降低,差异显着,具有统计学意义（P<0.05）;在血压方面,与模型组比较,双清平化方高剂量组SBP、DBP明显降低,差异显着,具有统计学意义（P<0.05）,且各中药组血压水平与剂量呈反比;在糖代谢方面,与模型组相比,双清平化方高剂量组FBG、FINS、HOMA-IR明显减低,差异显着,具有统计学意义（P<0.05）,且各中药组FBG、FINS、HOMA-IR的水平与剂量呈反比;在血管内皮功能方面,与模型组比较,双清平化方高剂量组NO含量明显升高,ET-1、AngⅡ含量明显降低,差异显着,具有统计学意义（P<0.05）,并且各剂量组呈量效关系。3 HE染色镜下显示:与正常组比较,模型组大鼠的主动脉内膜与中膜明显增厚形成斑块,部分细胞肿胀结构破裂,可见散在分布的胆固醇结晶;与模型组比较,各治疗组内皮细胞、平滑肌细胞的形态结构以及血管内膜与中膜的病理改变均有明显改善,以SPHD-H组及VC组改善最为显着。Masson染色镜下显示:与正常组比较,模型组大鼠发现血管壁全层均有明显胶原沉积,血管细胞和弹力纤维排列紊乱;与模型组比较,各治疗组胸主动脉中胶原沉积均有所改善,以SPHD-H组及VC组改善最显着。4 Western Blot法结果显示:与正常组比较,模型组肾脏组织ACE、AT1R蛋白表达水平显着增加（P<0.05）,AT2R蛋白表达水平显着降低（P<0.05）;与模型组比较,双清平化方各剂量组及缬沙坦组肾脏组织ACE、AT1R蛋白表达水平显着降低（P<0.05）,AT2R蛋白表达水平显着增加（P<0.05）;其中双清平化方高剂量组肾脏组织中ACE、AT1R、AT2R的蛋白表达水平与缬沙坦相似。结论1双清平化方可降低MS大鼠的血压、血糖,改善中心性肥胖及胰岛素抵抗。2双清平化方可以恢复ET-1/NO的平衡状态,改善血管内皮功能,对血管具有一定的保护作用。3双清平化方可下调肾脏ACE、AT1R蛋白的表达,上调肾脏AT2R蛋白的表达,降低血清AngⅡ的含量,推测其降压机制可能与调控RAS系统有关。图11幅;表10个;参125篇。
马越[6]（2020）在《经静脉单次注射尿苷腺苷四磷酸盐对小鼠血压的双相作用》文中研究说明目的:与去甲肾上腺素（NA）和α,β-meATP（α,β-亚甲基三磷酸腺苷）对麻醉小鼠的升压作用相比较,观察经外周静脉不同剂量的尿苷腺苷四磷酸盐（Up4A）单次注射对麻醉小鼠颈总动脉血压的影响。方法:通过乌拉坦（1.5 g/kg）腹腔注射麻醉小鼠,开放小鼠的尾静脉用予静脉给药,利用颈总动脉插管法测量颈总动脉血压,采用八道生理记录仪Powerlab/8sp记录不同剂量的Up4A、NA和α,β-meATP注射后麻醉小鼠颈总动脉SBP、DBP、MBP的改变。第一部分实验:采用随机数字表达法将18只清洁级昆明种雄性小鼠分为3组,即Up4A组、NA组和α,β-meATP组（n=6）。每组小鼠经尾静脉分别按1、3、10和30 nmol/kg的剂量由低到高给药,每个剂量的给药间隔为20min。第二部分实验:将6只清洁级昆明种雄性小鼠经尾静脉分别按20、40、60和80nmol/kg的剂量由低到高给予Up4A,每个剂量的给药间隔为20min。结果:第一部分实验结果:经尾静脉注射1、3、10和30 nmol/kg NA和α,β-meATP均可剂量依赖性地升高颈总动脉的SBP、DBP和MBP,在注射药物后血压在10 s内迅速达到峰值,后又迅速下降并在120 s内完全恢复至药前水平。而经尾静脉给予同剂量的Up4A对小鼠颈总动脉血压的影响不显着。30nmol/kg剂量的NA升高小鼠颈总动脉血压SBP、DBP和MBP的值分别是:36.71±10.26 mmHg、32.86±11.04 mmHg、34.14±10.57mmHg;30nmol/kg剂量的α,β-meATP升高小鼠颈总动脉血压SBP、DBP和MBP的值分别是:64.14±16.28 mmHg、63.86±12.16 mmHg、63.95±13.19 mmHg;30nmol/kgUp4A升高小鼠颈总动脉血压SBP、DBP和MBP的值分别是:6.10±2.13 mmHg、8.70±3.37mmHg、7.84±2.91 mmHg。三组相互比较均具有显着的统计学差异。第二部分实验结果:经尾静脉注射20、40、60和80 nmol/kg剂量的Up4A均对麻醉小鼠的血压产生双相变化,血压在注药后10 s内迅速下降达到峰值,随后迅速上升,大约在30s达到高峰值,后缓慢下降约在10min后恢复至药前水平,无论是首发的血压降低或是继发的血压升高均具有剂量依赖性,血压降低的水平低于血压升高的水平,且对舒张压的影响强于收缩压。80nmol/kg剂量的Up4A降低小鼠颈总动脉血压SBP、DBP和MBP的值分别是:11.8±2.59 mmHg、17.6±3.44 mmHg、15.67±2.66 mmHg;继而升高小鼠颈总动脉血压SBP、DBP和MBP的值分别是:21.6±8.08mmHg、26.6±9.04 mmHg、24.93±8.34 mmHg。结论:1.与目前发表的文献报道比较,发现Up4A对血压的影响可能因为给药方式和给药途径的不同而出现不同的实验结果,本实验经外周浅静脉给药更接近于临床实践。2.与儿茶酚胺受体激动剂NA和特异性P2X1受体激动剂α,β-meATP比较,Up4A升压效果明显较弱;将Up4A经外周静脉单次注入血管后,可能其嘧啶结构优先与血管内皮的相关受体结合发挥舒张血管的作用,继而其嘌呤结构与血管平滑肌相关受体结合后诱发血管收缩,进而使血压出现先降低后升高的双相变化。3.本实验中Up4A引发血压升高后恢复时间较α,β-meATP和NA明显延长,并且对舒张压的影响强于收缩压,是不是加重了高血压的进展有待于进一步研究。
赖鑫[7]（2020）在《电针对SHR大鼠心肌保护及对心肌差异蛋白表达影响研究》文中指出目的:高血压病是危害人类健康的心血管疾病之一,而心肌肥厚是其最常见的并发症。高血压心肌肥厚一旦形成,最终将可导致心律失常、心肌梗死、心力衰竭和心源性猝死等恶性心血管事件的发生。因此,探讨高血压心肌肥厚的发生机制对防治具有重要意义。目前大量临床研究已证实,针灸可以通过多靶点、多途径改善心肌重构,减少心血管事件的发生。而太冲、太溪穴为肝经、肾经之原穴,前者可以疏肝理气,清肝降压,镇惊熄风;后者可以滋肾阴,涵肝木,亦可强腰膝,二穴相配,共可滋阴固肾、平肝降压。故本实验利用自发性高血压大鼠（Spontan eous Hypertension Rat,SHR）建立高血压心肌肥厚模型,采用电针太冲、太溪穴进行干预,通过平行反应监测（Parallel Reaction Monitoring,PRM）、Western-blot 技术从蛋白层面探讨高血压心肌肥厚的致病机理以及电针太冲、太溪穴的作用机制,为针灸治疗高血压心肌肥厚提供新的理论依据。方法:1.实验分组及干预将30只SHR大鼠根据体重随机分为三组,分别为:模型组（SHR组）、电针组（EA组）、非穴组（Sham组）,每组各10只。并将10只同周龄的Wistar大鼠作为正常对照组（WKY组）。WKY组、SHR组:采取与Sham组和EA组相同的抓取和固定方法,但不以予针刺及电针治疗。Sham组:针刺大鼠相应穴位:太冲穴对应于后肢足背第3、4趾骨结合部之前凹陷处,太溪穴对应于大鼠脚跟部前3-5mm处。EA组:选取单侧太冲和太溪穴进行针刺。针刺后,将两针柄连接于电针治疗仪,给予电针刺激（疏密波,2Hz/15Hz,强度为1mA,每次20min,每日一次,共连续治疗8周）。2.观察指标（1）血压、心率于实验开始前、实验中第1、2、3、4、5、6、7周、第8周实验完成后,检测上诉各组大鼠收缩压、舒张压以及心率的变化;（2）心脏指数、左右肾指数于第8周实验完成后,测量上诉各组大鼠的全心重量、左心室重量、左、右肾脏重量以及体质量,并计算全心指数、左心室指数、左、右肾指数;（3）心肌胶原纤维容积分数、Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值于实验第8周实验完成后,利用Masson染色计算上诉各组大鼠心肌胶原纤维容积分数,利用天狼星红染色计算上诉各组大鼠心肌Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值;（4）心、肾组织的形态学观察于实验第8周实验完成后,利用HE染色法观察上诉各组大鼠心、肾组织变化情况,并计算心肌细胞横截直径及面积。（5）心肌差异蛋白表达于实验第8周实验完成后,利用PRM技术检测上诉各组大鼠心肌差异蛋白的表达情况。（6）检测蛋白的验证于实验第8周实验完成后,利用Western-blot技术检测上诉各组大鼠心肌SOD1、SOD2、HSP60、HSP70、肌球蛋白轻链、脂肪酸结合蛋白的表达情况。结果:1.血压、心率结果显示大鼠收缩压、舒张压以及心率治疗时间主效应显着（P<0.01）;分组因素主效应显着（P<0.01）,时间和分组因素交互作用显着（P<0.01）。进一步固定时间因素于同一水平,从第0周到第8周,与WKY组比较,SHR组和Sham组大鼠收缩压、舒张压、心率均增加（P<0.01）,有统计学意义;从第1周到第8周,与SHR组比较,EA组大鼠的即时收缩压、舒张压、心率均降低（P<0.01）,有统计学意义;与Sham组比较,EA组大鼠的即时收缩压、舒张压、心率均降低（P<0.01）,有统计学意义;2.心脏指数结果显示与WKY组比较,SHR组大鼠全心重量、全心指数、左心室重量、左心室指数增加（P<0.01）,有统计学意义;Sham组大鼠全心指数、左心室指数增加（P<0.01,P<0.05）,有统计学意义;全心重量、左心室重量增加（P>0.05）,无统计学意义;与SHR组比较,EA组大鼠全心重量、全心指数、左心室重量、左心室指数降低（P<0.01）,有统计学意义;与Sham组比较,EA组大鼠全心重量、全心指数、左心室重量及左心室指数降低（P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05）,有统计学意义。3.肾脏指数结果显示与WKY组比较,SHR组大鼠左、右肾指数增加（P<0.05）,有统计学意义;Sham组大鼠左、右肾指数增加（P<0.01,P<0.05）,有统计学意义;与SHR比较,EA组大鼠左、右肾指数降低（P<0.05）,有统计学意义;与Sham组比较,EA组大鼠左、右肾指数降低（P<0.01,P<0.05）,有统计学意义。4.心肌胶原纤维容积分数、Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值结果显示与WKY组比较,SHR组大鼠心肌胶原纤维容积分数、Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值增加（P<0.01）,有统计学意义;Sham组大鼠心肌胶原纤维容积分数、Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值增加（P<0.01）,有统计学意义;与SHR组比较,EA组大鼠心肌胶原纤维容积分数、Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值降低（P<0.01）,有统计学意义;与Sham组比较,EA组大鼠心肌胶原纤维容积分数、Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值降低（P<0.01）,有统计学意义。5.心肌细胞横截直径及面积结果显示与WKY 比较,SHR组大鼠心肌细胞横截直径及面积增加（P<0.01）,有统计学意义;Sham组大鼠心肌细胞横截直径增加（P<0.01）,有统计学意义;心肌细胞面积增加（P>0.05）,无统计学意义;与SHR组比较,EA组大鼠心肌细胞横截直径及面积降低（P<0.01）,有统计学意义;与Sham组比较,EA组大鼠心肌细胞横截直径及面积降低（P<0.01,P<0.05）,有统计学意义。6.心、肾组织的形态学观察结果显示心肌HE染色:SHR组:与WKY组比较,心肌纤维排列紊乱、断裂;心肌细胞肥大,细胞间隙水肿明显;心肌间质可见炎细胞浸润及纤维细胞增生;EA组:与SHR组和Sham组比较,心肌细胞肿胀、肥大程度下降,间质水肿减轻,心肌纤维排列整齐;心肌间质炎细胞浸润及纤维细胞减少。肾组织HE染色:SHR组:与WKY组比较,蛋白颗粒析出;炎症细胞浸润。EA组:与SHR组和Sham组比较,蛋白颗粒析出、炎症细胞浸润减少。7.差异蛋白表达结果显示与WKY组比较,SHR组大鼠心肌肌酸激酶B型、肌酸激酶M型、SOD2、HSP27蛋白表达减少（P<0.01）,有统计学意义;ATP合成酶、HSP70、肌球蛋白轻链3、脂肪酸结合蛋白、肌球蛋白轻链2、SOD1、分拣连接蛋白、MAPK激酶蛋白表达减少（P<0.05）,有统计学意义;Ⅰ型胶原蛋白、α烯醇化酶、钙蛋白酶蛋白、丙酰辅酶A羧化酶蛋白表达增加（P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05）,有统计学意义;HSP60、动力相关蛋白1表达减少（P>0.05）,无统计学意义;Sham组大鼠心肌肌酸激酶B型、肌酸激酶M型、肌球蛋白轻链3、脂肪酸结合蛋白表达减少（P<0.01）,有统计学意义;ATP合成酶、动力相关蛋白1、SOD1、SOD2、HSP27蛋白表达减少（P<0.05）,有统计学意义;Ⅰ型胶原蛋白、α烯醇化酶、丙酰辅酶A羧化酶、钙蛋白酶表达增加（P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05）,有统计学意义;HSP60、HSP70、肌球蛋白轻链2、分拣连接蛋白、MAPK激酶蛋白表达减少（P>0.05）,无统计学意义;与SHR组比较,EA组大鼠心肌肌酸激酶B型、肌酸激酶M型蛋白表达增加（P<0.01）,有统计学意义;ATP合成酶、HSP70、肌球蛋白轻链3、脂肪酸结合蛋白、肌球蛋白轻链2、分拣连接蛋白、MAPK激酶蛋白表达增加（P<0.05）,有统计学意义;Ⅰ型胶原蛋白、钙蛋白酶、α烯醇化酶、丙酰辅酶A羧化酶蛋白表达减少（P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05）,有统计学意义;HSP60、动力相关蛋白1、SOD1、SOD2、HSP27增加（P>0.05）,无统计学意义。与Sham组比较,EA组大鼠心肌肌酸激酶M型、肌酸激酶B型、脂肪酸结合蛋白、动力相关蛋白1表达增加（P<0.01）,有统计学意义;ATP合成酶、HSP70、肌球蛋白轻链3、肌球蛋白轻链2蛋白表达增加（P<0.05）,有统计学意义;Ⅰ型胶原蛋白、丙酰辅酶A羧化酶、α烯醇化酶、钙蛋白酶蛋白表达减少（P<0.01）,有统计学意义;SOD1、SOD2、HSP27、分拣连接蛋白、HSP60、MAPK激酶蛋白增加（P>0.05）,无统计学意义。8.蛋白验证的结果显示与WKY组比较,SHR组大鼠心肌SOD1、SOD2、肌球蛋白轻链、脂肪酸结合蛋白、HSP70 表达减少（P<0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.05）,有统计学意义;HSP60蛋白表达减少（P>0.05）,无统计学意义。Sham组大鼠心肌SOD1、SOD2、HSP60、HSP70、肌球蛋白轻链、脂肪酸结合蛋白表达增加或减少（P>0.05）,无统计学意义。与SHR组比较,EA组大鼠心肌SOD1、SOD2、HSP60、HSP70、肌球蛋白轻链、脂肪酸结合蛋白表达增加（P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01）,有统计学意义。与Sham组比较,EA组大鼠心肌SOD1、肌球蛋白轻链、HSP70、脂肪酸结合蛋白表达增加（P<0.05）,有统计学意义;SOD2、HSP60表达增加（P>0.05）,无统计学意义结论:1.SHR大鼠收缩压、舒张压、心率、全心重量、左心室重量、全心指数、左心室指数、左、右肾指数、心肌细胞横截直径及面积、心肌胶原纤维容积、Ⅰ/Ⅲ胶原纤维比值均增加;而电针可以逆转上诉指标。2.从HE染色图片的变化看,SHR大鼠心肌细胞、细胞间隙水肿明显;心肌间质炎细胞浸润及纤维细胞增生,肾组织中蛋白颗粒析出;炎症细胞浸润,而电针可以逆转上诉心肌病理性表现。3.SHR大鼠心肌肌酸激酶B型、肌酸激酶M型、ATP合成酶、肌球蛋白轻链3、脂肪酸结合蛋白、肌球蛋白轻链2、SOD1、SOD2、HSP27、HSP70、分拣连接蛋白、MAPK激酶蛋白表达降低,而Ⅰ型胶原蛋白、α烯醇化酶、钙蛋白酶、丙酰辅酶A羧化酶蛋白表达的增加;4.电针可以增加SHR大鼠心肌肌酸激酶B型、肌酸激酶M型、ATP合成酶、肌球蛋白轻链3、脂肪酸结合蛋白、肌球蛋白轻链2、分拣连接蛋白、HSP70、MAPK激酶蛋白表达,而减少钙蛋白酶、Ⅰ型胶原蛋白、α烯醇化酶、丙酰辅酶A羧化酶蛋白的表达。
林清,方淼,龚雨菲,晋学庆[8]（2019）在《缬沙坦通过调节心脏ACE2抑制自发性高血压大鼠左室重构》文中认为目的探讨缬沙坦可能通过调节心脏血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和血管紧张素转化酶2（ACE2）的方式降低自发性高血压大鼠的收缩压水平及心肌纤维化程度,揭示心脏AngⅡ和ACE2逆转左心室重构、拮抗心肌纤维化中的作用。方法 10～12周龄雄性SHR系大鼠共30只,随机分为对照组、低剂量缬沙坦组（10 mg/kg·d）、高剂量缬沙坦组（30 mg/kg·d）,每组10只。另以月龄、体重相同的WKY系大鼠8只作为健康对照组。使用RBP-I型大鼠血压心率测定仪测量大鼠尾动脉收缩压（SBP）。干预12周后全部处死,测量左心室重量,计算左室重量指数（LVMI）。酶联免疫吸附实验（ELISA）检测心肌组织及血浆中血管紧张素Ⅱ水平。天狼星红苦味酸法观测心脏胶原纤维的改变。蛋白质印迹法（Western Blot）检测心脏ACE2蛋白水平的表达。结果①缬沙坦可显着降低自发性大鼠的收缩压,并且在高剂量缬沙坦组中最为明显。②缬沙坦可显着降低自发性大鼠心肌组织中AngⅡ、上调血浆中AngⅡ水平,以高剂量缬沙坦组最为显着。③缬沙坦可明显降低心肌细胞及小动脉周围的纤维化程度。④缬沙坦可促进心肌组织表达ACE2,并且呈浓度依赖的趋势。结论缬沙坦可显着降低自发性高血压大鼠收缩压,并且可通过下调心肌组织中AngⅡ、上调ACE2的表达来减轻心肌纤维化、逆转心室肥厚,且这些效应呈浓度依赖性。
李晋[9]（2019）在《细胞色素P450 4A11酶促血压调节相关研究》文中研究指明细胞色素P450 4s（CYP4s）,在人体多个器官有表达,能通过羟化作用将体内花生四烯酸（AA）代谢为脂肪酸20-羟基二十碳四烯酸（20-HETE）。CYP4s表达或活性改变可引起机体20-HETE量的变化。有研究认为,20-HETE可能作用影响血压调节的不同部位。20-HETE既是非常有效的血管收缩剂,它也能促进肾近曲小管和髓袢升支粗段的尿钠排泄,抑制钠重吸收而起到降血压作用。CYP4s是否有效调节血压且通过20-HETE,其效果及机制目前并不清楚。本课题为探索CYP4s促血压调节的效果及机制,且是否可能经20-HETE实现。为选择可能与原发性高血压（EH）更相关的CYP4s,首先考察了中国南方汉族EH人群与CYP4s家族中CYP4A11、CYP4F12、CYP4F2、CYP4F3及相关泛素连接酶Cullin3（CUL3）和Kelch样家族成员3（KLHL3）多个单核苷酸多态性（SNP）的相关性;最后发现CYP4A11、CYP4F3及CUL3和KLHL3有显着影响EH发病的SNPs,可能显着增加EH致病风险的有CYP4A11,故选其做目标酶深入考察,并通过动物、动物器官和细胞实验等3个不同角度去验证CYP4A11对血压的调节作用,以及是否通过20-HETE发挥该作用。首先是构建带绿色荧光的CYP4A11小鼠同源且功能也相似的Cyp4a10过表达慢病毒载体,并经测序、比对及在两种细胞系中转染验证,确定载体完整度及可用性。随后将载体经尾静脉注射稳定转染至C57BL/6J与eNOS（-/-）两种同源雄性小鼠体内,以建立Cyp4a10稳定过表达小鼠模型,并从荧光显色、免疫组化、多个重要器官中Cyp4a10蛋白和mRNA水平评价转染效果,结果证实Cyp4a10在小鼠体内过表达。同时对造模后小鼠与对照小鼠收缩压进行监测,考察Cyp4a10转染对血压的影响,是否受HET0016（20-HETE合成及Cyp4a酶特异性抑制剂）影响及小鼠体液中20-HETE的变化规律。结果发现Cyp4a10表达与血压正相关,且能被HET0016阻止,Cyp4a10表达与小鼠体液中的20-HETE也正相关,因此,Cyp4a10可能会促小鼠血压上升,且20-HETE发挥了作用,推测同源且功能接近的CYP4A11也可能有此作用。其次是通过上述模型小鼠离体主、肾动脉考察Cyp4a10对血管张力的影响及与20-HETE可能的关系,结果发现在用L-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）限制内皮功能后,Cyp4a10过表达后小鼠的主动脉被肾上腺素诱导收缩后弹性恢复明显弱于野生型小鼠的主动脉。同时考察Cyp4a10过表达后主动脉、肾动脉中血管紧张素I转化酶-1（ACE1）、血管紧张素II受体-1（AT1R）、内皮素-1（ET1）、内皮素-1受体（ETAR）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）（肾动脉额外考察了腺苷三磷酸酶alpha（ATPaseα））等多个血管张力调节因子的蛋白与mRNA水平的变化,结果发现在离体器官中显着上调血管收缩因子并下调血管舒张因子,且与20-HETE正相关,可以推测,同源且功能接近的CYP4A11酶可能显着改变小鼠主、肾动脉的张力表现,且对血管调节因子表达的影响是促血管收缩。最后是细胞试验,获取CYP4A11转染质粒并设计合成、筛选沉默CYP4A11表达的siRNA,随后各自转染以构建过度或沉默CYP4A11表达的4种细胞模型,再考察CYP4A11在人源EA.hy926与HK-2细胞系中过表达或沉默后细胞系中上述多个血管张力调节因子的变化,结果发现CYP4A11与多种血管张力调节因子的蛋白、mRNA表达正相关,在细胞中显着上调血管收缩因子并下调血管舒张因子,且证实是通过20-HETE发挥作用。经过动物整体、离体器官与细胞试验,本课题发现CYP4A11可以显着促血压调节,当其表达增加时,可促血管收缩与血压上升,且这个调节作用很可能是通过20-HETE实现的,也可能是CYP4A11的SNP与EH显着相关的机制所在。本课题为完善CYP4A11调节血压机制打下了一定基础,为EH的诊疗与防治提供了新思路与新策略。
何聪[10]（2019）在《HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型的建立及中药干预》文中指出目的:以自发性高血压大鼠（Spontaneously hypertensive rat,SHR）为基础,采用颈内动脉月桂酸钠注入法,联合长期激怒法刺激诱导形成具备阴虚阳亢、瘀血阻络证候特色的高血压病合并腔隙性脑梗死（Hypertension-lacuna infarction comorbidity,HLIC）动物模型,并从行为学、形态学、功能、生化和分子多角度对动物模型进行评价。并在此基础上探究复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证的药效作用,以期为复方七芍降压片的临床应用提供更多实验依据。方法:1.HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型建立与评价:将20只SHR随机分为模型组及假手术组,每组10只,另10只Wistar Kyoto（WKY）大鼠设为空白对照组;模型组大鼠采用颈内动脉月桂酸钠注入法进行造模,假手术组采用颈内动脉注入生理盐水进行处理,空白对照组不做任何处理。每日观察大鼠皮毛色泽、饮水饮食变化、大小便状况以及是否出现烦躁易激惹等情况。于造模后第3天、第7天进行行为学测试,并于造模后第7天取大鼠血清、脑组织进行血脂、内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）、组织型纤溶酶原激活物抑制剂-1（Plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1）、光学显微镜及透射电镜等检测。2.复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证的干预作用:将40只SHR随机分为模型组、西药组（硝苯地平片+胞磷胆碱钠片）、中药组（复方七芍降压片）及假手术组,每组10只,另10只WKY大鼠设为空白对照组;模型组、西药组、中药组大鼠采用颈内动脉月桂酸钠注入法进行造模,假手术组采用颈内动脉注入生理盐水进行处理,空白对照组不做任何处理。模型组、假手术组、空白对照组予以纯净水灌胃,西药组予以硝苯地平片+胞磷胆碱钠片灌胃,中药组予以复方七芍降压片灌胃。实验期间每7天测量大鼠尾动脉收缩压1次,干预处理14天后取大鼠血清、脑组织进行大鼠血清血脂、超敏C反应蛋白（Hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP）、同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）、ET-1和PAI-1表达水平,以及脑组织内ET-1、内皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthase,eNOS）、血栓烷（ThromboxaneA2,TXA2）合成酶CYP5A1和前列环素（Prostaglandin I2,PGI2）合成酶CYP8A1表达水平的测定。结果:1.HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型建立与评价（1）在采用颈内动脉月桂酸钠注入法造模后,模型组大鼠出现精神紧张,易激惹,同时存在皮毛色黄无光泽,毛发脱落较多,眼角可见少量分泌物,小便量少色深黄,粪便为质地较干,颗粒较小等表现。（2）与空白对照组相比,模型组及假手术组大鼠血压明显升高,且造模后呈明显上升趋势。（3）模型组大鼠在姿势反射试验、肢体不对称应用试验及角落试验里均存在明显的神经功能缺损表现,而空白对照组及假手术组不存在神经功能缺损表现。（4）与空白对照组比较,假手术组及模型组大鼠血清总胆固醇（Total cholesterol,TC）、甘油三酯（Triglyceride,TG）、低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）水平均明显升高,但在高密度脂蛋白胆固醇（High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）水平上各组之间无明显差异。（5）模型组大鼠血清ET-1、PAI-1水平较空白对照组相比均升高,与假手术组无明显差异。（6）HE染色:空白对照组、假手术组:神经元数量较多,细胞形态完整,细胞核大且呈圆形,细胞核内可见完整核仁。模型组:深穿支动脉管腔狭窄,部分管腔内可见血栓形成,管腔闭塞,血管周围伴有炎性细胞浸润;血管周围可见部分神经元胞核固缩,嗜酸性浓染,核仁消失,细胞结构不清,周围有炎性细胞浸润。（7）透射电镜结果:模型组大鼠脑内深穿支动脉内皮受损,细胞膜断裂不连续,并可见到血管外周基质水肿,血管腔被挤压变形,血管周围组织间隙增宽;部分深穿支动脉可见血管内皮与血管基膜出现分离;有的部位可见到星形胶质细胞肿胀,并伴有足突水肿,核内染色质聚集、边集,部分线粒体出现空泡样变;偶可见到坏死神经元,其细胞形态结构已分辨不清,核内染色质聚集成块状,核仁消失,可见线粒体肿胀空化。大脑中动脉无明显受损表现,其血管内膜结构完整,可见到连续性紧密联接,血管外周基质也无明显水肿表现。2.复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证的干预作用:（1）经过7天的喂养及灌胃,假手术组及模型组大鼠尾动脉收缩压呈明显上升趋势,而西药组及中药组大鼠尾动脉收缩压均较给药前明显下降,且下降幅度大致相当。经过14天的喂养及灌胃处理,各组大鼠血压较前一次测量值均无明显变化,这提示无论是西药干预还是中药干预都可获得良好且稳定的降压效果,且降压效果大致相当。（2）经过14天相应药物干预处理后,西药组及中药组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平较模型组均有降低,且中药组降低幅度较西药组更大。而就统计结果来看,在血清HDL-C水平上各组大鼠与空白对照组之间无明显差异。（3）经过14天相应药物干预处理后,西药组及中药组大鼠脑组织内皮型一氧化氮合酶及PGI2合成酶CYP8A1在表达阳性目标数及阳性目标积分光密度值上均较模型组升高,且升高幅度大致相当;而西药组及中药组大鼠脑组织TXA2合成酶CYP5A1及ET-1在表达阳性目标数及阳性目标积分光密度值上均较模型组降低,且降低幅度大致相当。（4）经过14天相应药物干预处理后,西药组及中药组大鼠血清hs-CRP、ET-1及Hcy水平均较模型组降低,且两组下降幅度相当;而在血清PAI-1水平上,中药组较模型组、西药组均降低。结论:（1）采用SHR联合颈内动脉月桂酸钠注入法及长期激怒法所构建的动物模型,符合HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络的临床发病特点及病理改变,证明该方法成功制备了HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型。（2）复方七芍降压片可通过降低血压、调节脂质代谢紊乱、抑制缩血管物质在脑中的表达、促进扩血管物质在脑组织中的表达等途径,发挥保护脑中小动脉和微动脉的血管内皮功能、抑制凝血系统的过度激活、减轻血管局部炎症反应等保护靶器官的作用。
二、缓激肽在大鼠尾动脉缩血管作用机制探讨（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、缓激肽在大鼠尾动脉缩血管作用机制探讨（论文提纲范文）
（1）降香及替代药材对HMWD导致的微循环障碍的影响和其主治相关疾病作用机制的网络药理学探讨（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 第一部分:降香及其替代药材抗高分子右旋糖酐导致的微循环障碍比较研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 实验造模及给药 |
| 2.3 一般观察 |
| 2.4 小鼠耳廓微循环检测 |
| 2.5 大鼠肠系膜相关指标的检测 |
| 2.6 大鼠血流动力学相关指标检查 |
| 2.7 大鼠血液流变学相关指标检查 |
| 2.8 大鼠肺组织出血观察及评分 |
| 2.9 大鼠血清中血管扩张及收缩相关因子及纤溶系统指标检测 |
| 2.10 大鼠血清中脏器损伤指标检测 |
| 2.11 统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般观察结果 |
| 3.2 大鼠一般状况观察 |
| 3.3 大鼠肺脏组织出血观察及评分 |
| 3.4 血液流变学指标变化 |
| 3.5 微血管直径变化 |
| 3.6 .微血管红细胞流速变化 |
| 3.7 大鼠左颈动脉压的变化 |
| 3.8 大鼠心电的变化 |
| 3.9 血清中血管扩张及收缩相关因子及纤溶系统指标检测 |
| 3.10 大鼠血清中脏器损伤指标检测 |
| 4 讨论 |
| 第二部分:基于网络药理学探讨降香功能主治相关疾病的作用机制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 降香活性成分和靶点的获取 |
| 1.2 降香靶点Metascape分析和疾病靶点的获取 |
| 1.3 靶点Venn图和降香活性成分-靶点-疾病网络图构建 |
| 1.4 靶点蛋白互作(PPI)网络的构建 |
| 1.5 靶点的GO生物功能和KEGG通路的富集分析 |
| 1.6 分子对接验证 |
| 2.0 分析结果 |
| 2.1 降香靶点的收集和Metascape分析 |
| 2.2 疾病靶点的获取 |
| 2.3 靶点Venn图和降香活性成分-靶点-疾病网络图 |
| 2.4 共同靶点蛋白互作(PPI)网络 |
| 2.5 共同靶点的GO生物功能和KEGG通路富集分析 |
| 2.6 分子对接 |
| 2.7 CASP3、HMOX1、PPARG在人体不同组织和细胞的特异性表达 |
| 3.讨论 |
| 结论 |
| 期望 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
（2）基于血管紧张素转化酶2探究人参皂苷Rc改善内皮细胞胰岛素抵抗与血管内皮功能障碍的作用及机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写表 |
| 第1章 绪论 |
| 综述1 胰岛素抵抗与内皮功能障碍 |
| 1.1 胰岛素信号通路 |
| 1.2 炎症与IR |
| 1.2.1 炎症信号 |
| 1.2.2 炎症介导IR的机制 |
| 1.3 内皮功能障碍 |
| 1.3.1 内皮分泌的主要血管活性物质 |
| 1.3.2 内皮功能障碍的发生机制 |
| 1.3.3 血管内皮的胰岛素信号通路 |
| 1.3.4 IR与内皮功能障碍的相互关系 |
| 1.4 结语 |
| 综述2 经典RAS在糖尿病及其并发症中的作用与ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴的生物学功能 |
| 1.1 经典RAS在糖尿病及其并发症中的作用 |
| 1.1.1 经典RAS的构成 |
| 1.1.2 经典RAS与糖尿病及其并发症 |
| 1.2 ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴的构成 |
| 1.2.1 ACE2 的生物学特性及其激动剂和抑制剂 |
| 1.2.2 Ang-(1-7)的生物学特性 |
| 1.2.3 Mas的生物学特性及其激动剂和拮抗剂 |
| 1.3 ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴在几种常见疾病中的作用 |
| 1.3.1 ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴与高血压 |
| 1.3.2 ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴与动脉粥样硬化 |
| 1.3.3 ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴与心衰 |
| 1.3.4 ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴与中风 |
| 1.3.5 ACE2/Ang-(1-7)/Mas轴与糖尿病 |
| 1.4 结语 |
| 第2章 ACE2 在高糖诱导HUVECS胰岛素抵抗中的变化 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 主要试剂与仪器 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 HG对HUVECs存活率的影响 |
| 2.3.2 HG对HUVECs形态的影响 |
| 2.3.3 HG对HUVECs NO分泌含量及ET-1 mRNA水平的影响 |
| 2.3.4 HG对HUVECs胰岛素信号通路IRS1 蛋白表达的影响 |
| 2.3.5 HG对HUVECs胰岛素信号通路PI3K/Akt/eNOS蛋白表达的影响 |
| 2.3.6 HG对HUVECs ACE2及Mas蛋白表达的影响 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 人参皂苷RC改善高糖诱导HUVECS胰岛素抵抗的作用研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 主要试剂与仪器 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 人参皂苷Rc对HUVECs细胞存活率的影响 |
| 3.3.2 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs NO分泌含量及ET-1mRNA水平的影响 |
| 3.3.3 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs ROS产生的影响 |
| 3.3.4 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs培养液上清MDA含量及SOD活性的影响 |
| 3.3.5 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs促炎因子mRNA水平的影响 |
| 3.3.6 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs培养液上清Ang Ⅱ及Ang-(1-7)含量的影响 |
| 3.3.7 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs ACE2及Mas蛋白表达的影响 |
| 3.3.8 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs ACE2及Mas mRNA水平的影响 |
| 3.3.9 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs胰岛素信号通路IRS1蛋白表达的影响 |
| 3.3.10 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs胰岛素信号通路PI3K/Akt/eNOS蛋白表达的影响 |
| 3.3.11 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs NADPH氧化酶蛋白表达的影响 |
| 3.3.12 人参皂苷Rc对HG处理HUVECs IR相关炎症信号通路的影响 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 基于ACE2 探究人参皂苷RC改善高糖诱导HUVECS胰岛素抵抗的作用机制 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 主要试剂与仪器 |
| 4.2.2 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs NO分泌含量及ET-1 mRNA水平的影响 |
| 4.3.2 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs ROS产生的影响 |
| 4.3.3 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs培养液上清MDA含量及SOD活性的影响 |
| 4.3.4 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs促炎因子mRNA水平的影响 |
| 4.3.5 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs培养液上清Ang Ⅱ及 Ang-(1-7)含量的影响 |
| 4.3.6 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs ACE2及Mas蛋白表达的影响 |
| 4.3.7 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs ACE2及Mas mRNA水平的影响 |
| 4.3.8 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs胰岛素信号通路IRS1 蛋白表达的影响 |
| 4.3.9 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs胰岛素信号通路PI3K/Akt/eNOS蛋白表达的影响 |
| 4.3.10 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs NOX2蛋白表达的影响 |
| 4.3.11 人参皂苷Rc和MLN-4760对HG处理HUVECs IR相关炎症信号通路的影响 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 基于ACE2 探究人参皂苷RC改善DB/DB小鼠内皮功能障碍的作用及机制 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 实验动物 |
| 5.2.2 主要试剂与仪器 |
| 5.2.3 实验方法 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠体重和空腹血糖的影响 |
| 5.3.2 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠血清脂质及胰岛素含量的影响 |
| 5.3.3 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠血清促炎因子含量的影响 |
| 5.3.4 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠血清和主动脉Ang Ⅱ及 Ang-(1-7)含量的影响 |
| 5.3.5 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠主动脉ACE2及Mas蛋白表达的影响 |
| 5.3.6 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠胸主动脉内皮和非内皮依赖性舒张的影响 |
| 5.3.7 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠Akt/eNOS信号通路的影响 |
| 5.3.8 人参皂苷Rc和MLN-4760对db/db小鼠主动脉NADPH氧化酶蛋白表达的影响 |
| 5.4 小结 |
| 第6章 讨论 |
| 第7章 结论及展望 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 展望 |
| 本论文创新性 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
（3）可溶性鸟苷酸环化酶激动剂Vericiguat靶向调控AMPK/mTOR及自噬通路抑制病理性心肌肥厚的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略表 |
| 前言 |
| 一、研究背景 |
| 二、研究总体思路 |
| 第一部分 Vericiguat对AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞肥大的作用及机制研究 |
| 一、实验材料 |
| 1.1主要实验仪器和设备 |
| 1.2 主要试剂及耗材 |
| 1.3 主要试剂配置 |
| 二、实验方法 |
| 2.1 细胞株及细胞培养 |
| 2.2 细胞总RNA的提取 |
| 2.3 蛋白质免疫印迹(Western blot) |
| 2.4 免疫组织化学(imniunohistoclieinistry,IHC) |
| 2.5 共聚焦激光扫描显微镜(Confocal Laser Scanning Microscopy,CLSM) |
| 2.6 流式细财检测细胞调亡及活性氧产生（Flow Cytometry, FCM〉 |
| 2.7 反向分子对接筛选Vericiguat抗心肌重构的潜在耙标（reverse docking) |
| 2.8 Vericiguat对磷酸二酯酶PDE4D/PDE5A抑制活性检测CSPA) |
| 2.8.1 Vericiguat对PDE4D的活性测试 |
| 2.8.2 Vericiguat对PDE5A的活性测试 |
| 三、统计学分析 |
| 四、实验结果 |
| 4.1 不同浓度Vericiguat对H9c2心肌细胞活力的影响 |
| 4.2 Vericiguat可有效缓解AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞肥大 |
| 4.2.1 Vericiguat显着抑制AngⅡ刺激诱导的H9c2心肌细胞肥大 |
| 4.2.2 Vericiguat有效降低AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞肥大基因的表达 |
| 4.3 Vericiguat明显减轻AngⅡ刺激诱导的H9c2心肌细胞凋亡 |
| 4.4 Vericiguat明显减少肥大心肌中活性氧(ROS)的产生 |
| 4.5 Vericiguat对AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞肥大模型中TGF-β1/Smad2信号通路的影响 |
| 4.6 Vericiguat对AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞自噬调节的分子机制 |
| 4.7 Vericiguat对AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞肥大模型中HO-1/SOD3蛋白的影响 |
| 4.8 Vericiguat靶向心肌肥厚的机制预测 |
| 4.9 Vericiguat对PDE4D/PDE5A抑制活性检测 |
| 五、讨论与总结 |
| 第二部分 Vericiguat对AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚的作用及机制研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 2.1 血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥厚动物模型的建立 |
| 2.1.1 Alzet微量缓释泵预处理 |
| 2.1.2 微量缓释泵手术植入 |
| 2.2 小鼠心脏超声检测 |
| 2.3 蛋白质免疫印迹法检测蛋白表达变化(Western blot) |
| 2.4 HE染色 |
| 2.5 酶联免疫吸附测定小鼠血清BNP含量(ELISA) |
| 2.6 CODATM无创小鼠血压测量 |
| 2.7 小鼠左室心肌组织转录组生物信息学分析(RNA-seq) |
| 2.7.1 转录组样本的制备和后续检测 |
| 2.7.2 转录组数据分析 |
| 2.8 苦味酸-天狼猩红染色(Picric acid-Sirius red,PSR) |
| 2.9 马松三色染色(Masson's trichrome staining) |
| 2.10 苏木素-伊红染色(H&E staining) |
| 三、统计学分析 |
| 四、实验结果 |
| 4.1 AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚模型的建立及动物实验技术路线 |
| 4.2 心脏超声评估Vericiguat对小鼠心功能的影响 |
| 4.3 Vericiguat可减轻心肌肥厚小鼠心重/体重比 |
| 4.4 Vericiguat可以显着抑制AngⅡ刺激诱导的小鼠血压升高 |
| 4.5 Vericiguat可改善AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚 |
| 4.6 Vericiguat逆转AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚及病理性心脏重塑 |
| 4.6.1 Vericiguat有效改善小鼠心肌间质纤维化及心脏血管周围纤维化 |
| 4.6.2 Vericiguat显着降低小鼠心脏纤维化相关基因(Col1a1,Col3a1,α-SMA)的mRNA表达水平 |
| 4.6.3 Vericiguat明显降低小鼠心脏结构重构相关蛋白(MMP9,CaMKⅡ,α-SMA)的表达水平 |
| 4.7 转录组差异表达基因(RNA-seq) |
| 4.7.1 差异表达基因GO富集分析 |
| 4.7.2 差异表达基因KEGG富集分析 |
| 4.7.3 差异表达基因Reactome富集分析 |
| 4.7.4 差异基因集富集分析(GSEA) |
| 4.7.5 肥厚小鼠心肌组织差异基因集富集分析(GSEA) |
| 4.7.6 Vericiguat治疗后小鼠心肌组织差异基因集富集分析(GSEA) |
| 4.8 Vericiguat对AngⅡ诱导的小鼠心肌自噬相关蛋白的影响 |
| 4.9 Vericiguat对AngⅡ诱导的小鼠肥厚心肌中AMPK/mTOR信号通路的影响 |
| 4.10 Vericiguat显着降低AngⅡ诱导的小鼠肥厚心肌中VASP蛋白磷酸化 |
| 4.11 Vericiguat明显增强AngⅡ诱导的小鼠肥厚心肌中抗氧化蛋白酶的表达(HO-1,SOD2,SOD3) |
| 4.12 Vericiguat可以在动物水平下调ACE1的蛋白表达 |
| 4.13 Vericiguat可显着降低AngⅡ诱导的小鼠血清BNP水平 |
| 五、讨论与总结 |
| 参考文献 |
| 综述: NO-sGC-cGMP信号通路在心衰及心肌肥厚中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间科研工作 |
| 致谢 |
（4）高盐环境下内皮素受体介导的冠状动脉平滑肌损伤的机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 冠状动脉舒缩功能影响因素的研究进展 |
| 参考文献 |
（5）双清平化方对MS大鼠血压及IR、ACE、AngⅡ的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验资料 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 MS模型成模率情况 |
| 1.2.2 造模阶段大鼠肥胖相关指标变化情况 |
| 1.2.3 造模阶段大鼠血压的变化情况 |
| 1.2.4 造模阶段大鼠血糖的变化情况 |
| 1.2.5 给药前后各组大鼠的一般情况 |
| 1.2.6 给药后各组大鼠肥胖相关指标变化情况 |
| 1.2.7 给药后各组大鼠血压的变化情况 |
| 1.2.8 给药8 周各组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR的比较 |
| 1.2.9 给药8 周各组大鼠NO、ET-1、AngⅡ的比较 |
| 1.2.10 HE染色结果 |
| 1.2.11 Masson染色结果 |
| 1.2.12 各组大鼠肾脏组织ACE、AT1R、AT2R蛋白的表达 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 MS大鼠模型的构建 |
| 1.3.2 双清平化方组方分析 |
| 1.3.3 双清平化方对MS大鼠的干预作用及其降压机制 |
| 1.4 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 第2章 综述 代谢综合征高血压的中西医研究进展 |
| 2.1 代谢综合征的现代医学研究进展 |
| 2.1.1 代谢综合征的命名 |
| 2.1.2 代谢综合征的诊断标准 |
| 2.1.3 MS各组分与高血压的关系 |
| 2.2 中医认识及治疗进展 |
| 2.2.1 病因病机的认识 |
| 2.2.2 中医药治疗进展 |
| 2.3 问题与对策 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间研究成果 |
（6）经静脉单次注射尿苷腺苷四磷酸盐对小鼠血压的双相作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略图表 |
| 第一章 经静脉单次注射尿苷腺苷四磷酸盐对小鼠血压的双相作用 |
| 1.1 绪论 |
| 1.2 实验材料 |
| 1.2.1 主要仪器 |
| 1.2.2 主要试剂 |
| 1.3 实验动物与药物配制 |
| 1.4 方法 |
| 1.4.1 第一部分:不同剂量的α,β-meATP、NA、Up_4A对小鼠颈总动脉血压的影响 |
| 1.4.2 第二部分:不同剂量的Up_4A对小鼠颈总动脉血压的影响 |
| 1.5 统计学处理 |
| 1.6 结果 |
| 1.6.1 NA、α,β-meATP和 Up_4A三种药物对小鼠颈总动脉血压的影响 |
| 1.6.2 不同剂量Up_4A对小鼠颈总动脉SBP、DBP、MBP的影响 |
| 1.7 讨论 |
| 1.8 结论 |
| 参考文献 |
| 第二章 综述 |
| 2.1 Up_4A的生物合成和代谢 |
| 2.2 血管系统中的嘌呤能受体家族 |
| 2.3 Up_4A调节生理状态下血管功能 |
| 2.3.1 生理状态下Up_4A对不同物种的主动脉的调节作用 |
| 2.3.2 生理状态下Up_4A对大鼠肺动脉的作用 |
| 2.3.3 生理状态下Up_4A对冠状动脉的作用 |
| 2.3.4 生理状态下Up_4A对啮齿类动物肾血管的作用 |
| 2.3.5 Up_4A对其他血管床的作用 |
| 2.4 病理生理条件下Up_4A对血管的作用 |
| 2.4.1 Up_4A在高血压病动物模型的作用 |
| 2.4.2 糖尿病 |
| 2.4.3 冠状动脉粥样硬化 |
| 2.5 结论和展望 |
| 参考文献 |
| 实验不足与展望 |
| 致谢 |
（7）电针对SHR大鼠心肌保护及对心肌差异蛋白表达影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 理论研究 |
| 第一节 中医对高血压心肌肥厚的研究现状 |
| 一、中医对高血压心肌肥厚的认识 |
| 二、高血压心肌肥厚的病因病机 |
| 三、针灸治疗高血压心肌肥厚 |
| 第二节 现代医学治疗自发性高血压肥厚性心肌病的研究现状 |
| 一、高血压心肌肥厚的生理病理 |
| 二、高血压肥厚性心肌病的发病机制 |
| 三、高血压心肌肥厚的治疗 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 电针对自发性高血压大鼠心肌的保护作用研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第二节 电针对自发性高血压大鼠心肌差异蛋白表达的影响研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间论文发表情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（8）缬沙坦通过调节心脏ACE2抑制自发性高血压大鼠左室重构（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物与分组 |
| 1.2 大鼠收缩压及体重检测 |
| 1.3 左心室重量指数（LVMI）测定 |
| 1.4 酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血浆和心肌组织中AngII水平 |
| 1.5 心脏组织纤维化定量分析 |
| 1.6 Western Blot检测心肌细胞各蛋白表达量 |
| 1.7 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 缬沙坦对SHR大鼠尾动脉收缩压的影响 |
| 2.2 缬沙坦对大鼠左室重量指数的影响 |
| 2.3 缬沙坦对大鼠血浆AngⅡ及心肌AngⅡ水平的改变 |
| 2.4 缬沙坦对SHR大鼠心肌纤维化的影响 |
| 2.5 缬沙坦对SHR大鼠ACE2蛋白表达的影响 |
| 3 讨论 |
（9）细胞色素P450 4A11酶促血压调节相关研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 细胞色素P450(CYP)酶系 |
| 1.1.1 CYP概述 |
| 1.1.2 CYP功能 |
| 1.2 高血压及危险因素 |
| 1.2.1 高血压定义 |
| 1.2.2 高血压危险因素 |
| 1.3 血管张力调节因子 |
| 1.4 CYP与高血压的相关性 |
| 1.4.1 原发性高血压(EH) |
| 1.4.2 继发性高血压 |
| 1.4.3 高血压合并其它疾病 |
| 1.4.4 人种、性别、体重指数(BMI)的影响 |
| 1.5 CYP、内源性物质与高血压内在联系 |
| 1.5.1 内源性物质经CYP影响血压 |
| 1.5.2 高血压经CYP影响内源性物质表达 |
| 1.5.3 CYP参与内源性物质诱导的高血压 |
| 1.6 CYP4s及其代谢产物与血压调节的关系 |
| 1.6.1 CYP4s代谢特点 |
| 1.6.2 CYP4s代谢物20-HETE病生功能 |
| 1.7 高血压啮齿动物模型 |
| 1.7.1 常见非基因模型 |
| 1.7.2 常见基因模型 |
| 1.7.3 与CYP相关的高血压模型 |
| 1.8 血压调节研究技术 |
| 1.8.1 血压与血管张力测定技术 |
| 1.8.2 分子生物学技术 |
| 1.9 本课题目的、意义和主要内容 |
| 1.9.1 本课题目的、意义 |
| 1.9.2 本课题主要内容 |
| 第二章 CYP4s基因多态性与人原发性高血压相关性 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料、试剂与仪器 |
| 2.2.1 主要仪器与耗材 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.2.3 实验溶液 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 目标SNPs选择 |
| 2.3.2 病例选择与样本采集 |
| 2.3.3 血液DNA提取与浓度测定 |
| 2.3.4 DNA SNPs位点检测 |
| 2.3.5 统计与分析 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 目标SNPs选择 |
| 2.4.2 试验对象选择 |
| 2.4.3 全血DNA提取与测定 |
| 2.4.4 DNA位点扩增与检测 |
| 2.4.5 DNA位点SNPs与高血压关联性分析 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 CYP4A11 对模型小鼠血压的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料、试剂与仪器 |
| 3.2.1 实验对象 |
| 3.2.2 主要仪器与耗材 |
| 3.2.3 实验试剂 |
| 3.2.4 实验溶液、培养基和饲料 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.1 构建小鼠Cyp4a10 慢病毒载体与验证 |
| 3.3.2 小鼠Cyp4a10 慢病毒稳定转染验证实验 |
| 3.3.3 Cyp4a10 与小鼠血压相关性研究 |
| 3.3.4 统计分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 构建Cyp4a10 慢病毒载体与初步验证 |
| 3.4.2 小鼠Cyp4a10 慢病毒稳定转染验证 |
| 3.4.3 Cyp4a10 与小鼠血压相关性研究 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 CYP4A11 影响血管张力及相关调节因子的研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料、试剂、仪器 |
| 4.2.1 实验对象 |
| 4.2.2 主要仪器与耗材 |
| 4.2.3 实验试剂 |
| 4.2.4 实验溶液与培养基 |
| 4.3 试验方法 |
| 4.3.1 Cyp4a10 对小鼠血管张力影响 |
| 4.3.2 HET0016 对肾动脉、主动脉张力的影响 |
| 4.3.3 Cyp4a10 对小鼠器官血压调节蛋白影响的蛋白检测 |
| 4.3.4 Cyp4a10 对小鼠器官血压调节蛋白影响的mRNA检测 |
| 4.3.5 统计分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 小鼠血管张力测定 |
| 4.4.2 小鼠器官血管张力相关因子蛋白表达检测 |
| 4.4.3 小鼠器官血管张力相关因子mRNA检测 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 CYP4A11 影响血管张力调节因子的细胞学研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料、试剂和仪器 |
| 5.2.1 实验对象 |
| 5.2.2 主要仪器与耗材 |
| 5.2.3 实验试剂 |
| 5.2.4 实验溶液与培养基 |
| 5.3 试验方法 |
| 5.3.1 CYP4A11 siRNA筛选与验证 |
| 5.3.2 细胞系血管张力调节因子蛋白表达检测 |
| 5.3.3 细胞系血管张力调节因子mRNA检测 |
| 5.3.4 细胞上清20-HETE检测 |
| 5.3.5 统计分析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 CYP4A11 siRNA筛选与验证 |
| 5.4.2 细胞系血管张力调节因子蛋白表达检测 |
| 5.4.3 细胞系血管张力调节因子mRNA检测 |
| 5.4.4 细胞上清的20-HETE检测 |
| 5.5 本章小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 答辩委员会对论文评语 |
（10）HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型的建立及中药干预（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩写词表 |
| 引言 |
| 第一部分 HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型的建立及评价 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 一般情况观察 |
| 2.2 各组大鼠尾动脉收缩压变化情况 |
| 2.3 行为学测试结果 |
| 2.4 各组大鼠血清血脂水平 |
| 2.5 各组大鼠血清ET-1、PAI-1水平 |
| 2.6 各组大鼠脑组织HE染色结果 |
| 2.7 模型组大鼠透射电镜结果 |
| 第二部分 复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证的干预作用 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 各组大鼠尾动脉收缩压变化情况 |
| 2.2 各组大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平 |
| 2.3 各组大鼠脑组织内eNOS表达水平 |
| 2.4 各组大鼠脑组织内PGI2合成酶CYP8A1表达水平 |
| 2.5 各组大鼠脑组织内ET-1表达水平 |
| 2.6 各组大鼠脑组织内TXA2合成酶CYP5A1表达水平 |
| 2.7 各组大鼠血清hs-CRP、Hcy、ET-1和PAI-1水平 |
| 第三部分 讨论 |
| 1.高血压合并腔隙性脑梗死的西医学研究进展 |
| 1.1 西医学对高血压病的认识 |
| 1.2 西医学对腔隙性脑梗死的认识 |
| 1.3 高血压病与腔隙性脑梗死的相关性研究 |
| 2.高血压合并腔隙性脑梗死的中医学研究进展 |
| 2.1 中医学对高血压病的病名研究 |
| 2.2 中医学对高血压病的病因病机研究 |
| 2.3 中医学对高血压病的辨证论治研究 |
| 2.4 中医学对腔隙性脑梗死病因病机认识 |
| 2.5 中医学对腔隙性脑梗的方药研究 |
| 3.前期研究 |
| 3.1 复方七芍降压片治疗高血压病阴虚阳亢、瘀血阻络证患者的临床研究 |
| 3.2 复方七芍降压片治疗高血压合并腔隙性脑梗死阴虚阳亢、瘀血阻络证患者的临床研究 |
| 3.3 复方七芍降压片方药分析 |
| 4.动物病证模型研究进展 |
| 4.1 腔隙性脑梗死的动物模型的建立与评价进展 |
| 4.2 阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型的建立与评价进展 |
| 4.3 高血压合并腔隙性脑梗死阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型的建立与评价 |
| 5.实验结果分析 |
| 5.1 通过本实验初步确定HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型的评价标准 |
| 5.2 复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证大鼠血压的影响 |
| 5.3 复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证大鼠血脂的影响 |
| 5.4 复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证大鼠ET-1、eNOS、TXA2合成酶CYP5A1、PGI2合成酶CYP8A1的影响 |
| 5.5 复方七芍降压片对HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证大鼠hs-CRP、ET-1、HCY、PAI-1的影响 |
| 第四部分 结论 |
| 第五部分 存在的问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
四、缓激肽在大鼠尾动脉缩血管作用机制探讨（论文参考文献）
- [1]降香及替代药材对HMWD导致的微循环障碍的影响和其主治相关疾病作用机制的网络药理学探讨[D]. 谢欣序. 江西中医药大学, 2021
- [2]基于血管紧张素转化酶2探究人参皂苷Rc改善内皮细胞胰岛素抵抗与血管内皮功能障碍的作用及机制[D]. 王耀振. 吉林大学, 2021(01)
- [3]可溶性鸟苷酸环化酶激动剂Vericiguat靶向调控AMPK/mTOR及自噬通路抑制病理性心肌肥厚的机制研究[D]. 肖滢. 北京协和医学院, 2021(02)
- [4]高盐环境下内皮素受体介导的冠状动脉平滑肌损伤的机制研究[D]. 何可. 安徽医科大学, 2021(01)
- [5]双清平化方对MS大鼠血压及IR、ACE、AngⅡ的影响[D]. 王瑶瑶. 华北理工大学, 2020(02)
- [6]经静脉单次注射尿苷腺苷四磷酸盐对小鼠血压的双相作用[D]. 马越. 河北大学, 2020(08)
- [7]电针对SHR大鼠心肌保护及对心肌差异蛋白表达影响研究[D]. 赖鑫. 广州中医药大学, 2020(06)
- [8]缬沙坦通过调节心脏ACE2抑制自发性高血压大鼠左室重构[J]. 林清,方淼,龚雨菲,晋学庆. 中国分子心脏病学杂志, 2019(04)
- [9]细胞色素P450 4A11酶促血压调节相关研究[D]. 李晋. 华南理工大学, 2019(06)
- [10]HLIC阴虚阳亢、瘀血阻络证动物模型的建立及中药干预[D]. 何聪. 湖南中医药大学, 2019(02)